GB 中华人民共和国国家标准 GB5009.224—2016 食品安全国家标准 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定 2016-08-31发布 2016-09-20实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会 发布 GB5009.224-2016 前言 本标准代替GB/T21498一2008《大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定》. 本标准与GB/T21498一2008相比,主要变化如下: 一一标准名称修改为“食品安全国家标准大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定”; 一一删除了原标准范围中“胰蛋白酶抑制剂活性可以用来表示豆制品的烘烤程度”; 一—修改了“原理”; 修改了“试剂和材料”; 删除了“采样”; —修改了“试样制备”; 一一删除了“测定次数”; 修改了“结果计算”; 一—修改了“精密度”; 删除了“检验报告”; 删除了附录B. I GB5009.224-2016 食品安全国家标准 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定 1范围 本标准规定了大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性(TIA)的测定方法. 本标准适用于大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定. 2原理 胰蛋白酶可与苯甲酰-L精氨酸-对硝基苯胺(L-BAPA)发生反应,生成对硝基苯胺,该物质在 410m下有特征吸收.大豆制品中的胰蛋白酶抑制剂可抑制此反应,使吸光度值下降,其下降程度与 胰蛋白酶抑制活性成正比.采用分光光度计在410口m处测定该反应前后的吸光度值,可定量分析胰 蛋白酶抑制剂活性. 3试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水. 3.1试剂 3.1.1盐酸(HC). 3.1.2冰乙酸(CH.COOH). 3.1.3氢氧化钠(NaOH). 3.1.4氯化钙(CaCl22H2O) 3.1.5胰蛋白酶(Trypsin):一20℃冻藏. 3.1.6苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺(L-BAPA). 3.1.7三羟甲基氨基甲烷[NH2C(CH2OH)3 Tis]. 3.1.8二甲亚砜(C2HOS DMOS). 3.2试剂配制 3.2.1盐酸溶液(6mol/L):取50mL盐酸(3.1.1)加入水中,用水稀释至100mL 混匀. 3.2.2盐酸溶液(1mol/L):取83mL盐酸(3.1.1)加入水中,用水稀释至1000mL 混匀. 3.2.3盐酸溶液(0.1mol/L):取8.3mL盐酸(3.1.1)加入水中,用水稀释至1000mL 混匀. 3.2.4盐酸溶液(0.001mol/L):取1mL1mol/L盐酸溶液加入水中,用水稀释至1000mL.混匀. 3.2.5乙酸溶液(5.3mol/L):取30mL冰乙酸(3.1.2)加入水中,用水稀释至100mL 混匀. 3.2.6氢氧化钠溶液(0.01mol/L):称取0.40g氢氧化钠(3.1.3),溶于500mL水中,用水稀释 至1000mL 3.2.7氯化钙盐酸溶液:称取0.735g氯化钙(3.1.4)溶解于1L0.001mol/L盐酸溶液中,用1mol/L 盐酸溶液和0.1mol/L盐酸溶液调节pH至3.0士0.1. 1 ...
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