GB 5009.255-2016 食品安全国家标准 食品中果聚糖的测定.pdf

GB 中华人民共和国国家标准 GB5009.255—2016 食品安全国家标准 食品中果聚糖的测定 2016-08-31发布 2016-09-20实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会 .发布 GB5009.255-2016 食品安全国家标准 食品中果聚糖的测定 1范围 本标准规定了食品中果聚糖含量的离子色谱法测定方法. 本标准适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、固体饮料、配制酒中单独添加的 低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的测定. 2原理 试样经热水浸提，样液中的蔗糖经蔗糖酶水解成葡萄糖和果糖，葡萄糖和果糖经硼氢化钠还原成相 应的糖醇，多余的硼氢化钠用乙酸中和.样液中的果聚糖经过果聚糖酶水解成果糖和葡萄糖，经离子色 谱脉冲安培检测器测定果糖含量，通过换算系数，折算得到果聚糖的含量. 3试剂和材料 3.1试剂 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水. 3.1.1氢氧化钠(NaOH). 3.1.2马来酸(CHO4). 3.1.3蔗糖酶：来源于酵母，酶活力≥300U. 3.1.4硼氢化钠(NaBH). 3.1.5冰乙酸(CH COOH). 3.1.6三水乙酸钠(CHCOONa3H2O). 3.1.7果聚糖酶：来源于黑曲霉，酶活力≥10000U. 3.1.850%氢氧化钠溶液(NaOH):色谱纯. 3.1.9无水乙酸钠(CH3 COONa):纯度≥99.0%. 3.1.10氮气(N2):纯度≥99.9%. 3.2试剂配制 3.2.1氢氧化钠溶液(1mol/L):称取40g氢氧化钠（精确至0.01g) 溶于水并稀释至1000mL 室温 下可放置2个月. 3.2.2马来酸钠缓冲溶液(100mmol/L pH6.5):称取1.16g马来酸（精确至0.01g)于150mL烧杯 中，加入约70mL水溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH6.5 用水稀释至100mL.4℃保存，可放 置3个月. 3.2.3蔗糖酶溶液(4.5U/mL):将蔗糖酶（活力为300U)溶解于66mL马来酸钠缓冲溶液，分装到 2mL的离心管中，一20℃保存，可放置6个月.使用前需测定酶活力. 3.2.4氢氧化钠溶液(50mmol/L):称取2g氢氧化钠（精确至0.01g) 溶于水并稀释至1000mL 室 1 GB5009.255-2016 温下可放置2个月. 3.2.5硼氢化钠溶液(10mg/mL):准确称取适量硼氢化钠（精确至0.001g)于聚丙烯离心管中，用 50mmol/L氢氧化钠溶液溶解，最终质量浓度为10mg/mL 用时现配. 3.2.6乙酸溶液(200mmol/L):吸取0.6mL冰乙酸，用水稀释至50mL 4℃保存，可放置2个月. 3.2.7乙酸钠溶液(200mmol/L):称取1.36g三水乙酸钠（精确至0.01g) 溶于水并稀释至50mL 4℃保存，可放置2个月. 3.2.8乙酸钠缓冲溶液(pH4.5):吸取14mL乙酸溶液和11mL乙酸钠溶液混合，并用水稀释至 50mL 用时现配. 3.2.9果聚糖酶溶液(455U/mL):将果聚糖酶（活力为10000U)溶解于22mL乙酸钠缓冲溶液，分装 到2mL的离心管中，一20℃保存，可放置6个月.使用前需测定酶活力. 3.2.10氢氧化钠溶液(200mmol/1):取10.4mL.50%氢氧化钠溶液，用水稀释至1000mL 通入氮气 保护，缓慢摇匀，室温下可放置7d. 3.2.11氢氧化钠(150mmol/L)乙酸钠(500mmol/L)混合溶液：称取41g无水乙酸钠（...