ICS67.040 C53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.154—2003 代替GB/T17407-1998 食品中维生素B6的测定 Determination of vitamin B.in foods 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 291 GB/T5009.154—2003 前言 本标准对应于《A0AC 45维生素和营养素部分43 229食物中维生素B的微生物测定法》(1995 年版), 本标准与AOAC43.229的一致性程度为非等效, 本标准代替GB/T17407一1998(食品中维生素B测定》, 本标准按GB/T20001.4一2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行了 修改. 本标准由中华人民共和国卫生都提出并归口, 本标准起草单位:中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所, 本标准主要起草人:沈湘、周华、杨晓莉、王光亚, 原标准于1998年首次发布,本次为第一次修订, 292 GB/T5009.154-2003 食品中维生素B;的测定 1范图 本标准规定了用微生物法测定食品中的维生素B的含量. 本标准适用于各类食品中的维生素B的测定, 本标准也适用于饲料中的维生家B的测定, 本方法检出限为0.1ng线性范田为0 1ng~6ng. 2源理 食品中某一种细菌的生长必须要有某一种维生素的存在,卡尔斯伯(Saccharomyces Carlabrgensis) 酵母菌需在有维生素B存在的条件下才能生长,在一定条件下维生素B的量与其生长呈正比关系. 用比浊法测定该菌在试样液中生长的浑浊度,与标准曲线相比较得出试样中维生素的含量. 3.试剂 3.1琼指. 3.2吡哆醇Y培养基. 3.30.22mol/L硫酸溶液,于2000mL烧杯中加人700mL水,12.32mL硫酸(H2SO) 用水 稀释至1000mL 3.40.5mol/L硫酸溶液,于2000mL烧杯中加人700mL.水,28mL硫酸(HSO )用水稀释 至1000mL 3 510mol/L氢氧化钠溶液,溶200g氢氧化钠于水中,稀释至500mL 3.60.1mol/L氢氧化钠溶液,取10mL10mol/L氢氧化钠,用水稀释至1000mL 3.7培养基:称取吡哆醇Y培养基5.3g 落解于100mL蒸馏水中. 警告:本标准所用吡哆醇Y培养基不得含维生素B3生长因子, 3.8吡哆醇标准储备液(100热g/mL):称取122mg盐酸吡哆醇标准溶于1L25%乙醇中,保于4℃冰 箱中,稳定1个月. 3.9哆醇标准中间液(1pg/mL):取1mL吡哆醇标准储备液,稀释至100mL 3.10琼脂培养基:吡哆醇Y培养基5.3g 琼脂1.2g 稀释至100mL 3.11生理盐水:取9g氯化钠溶于1000mL水中, 3.12澳甲酚绿(0.4g/L):溶液,称取0.1g溴甲酚绿于研外中,加1.4mL0.1mol/L氢氧化钠研磨, 加少许水维续研磨,直至完全溶解,用水稀释到250mL 4仪器和设备 4.1电热恒培养箱, 4.2高压. 4 3液体快混合器. 4.4离心机. 4.5光分光光度计. 4.6硬质玻璃试管. 293 ...