ICS67.040 C53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.183-2003 部分代替GB16322一1996 植物蛋白饮料中脲酶的定性测定 Qualitative analysis of urease in vegetable protein drinking 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华人民共和国卫生部 中国国家标准化管理委员会 发布 475 GB/T5009.183—2003 前言 本标准代替GB16322一1996植物蛋白饮料卫生标准)中附录A“酶定性测定方法”， 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口， 本标准由辽宁省食品卫生监督检验所、北京市食品卫生监督检验所、天津市食品卫生监督检验所负 责起草. 本标准主要起草人：王旭太、徐继康、杨玉芝、徐留发、陆守政. 476 GB/T5009.183-2003 植物蛋白饮料中脲酶的定性测定 1范圈 本标准规定了植物蛋白饮料中联酶的定性测定方法. 本标准适用于植物蛋白饮料中脲酶的定性测定. 2原理 酶在活当的和温度下催化尿素，转化成碳酸铵，贵酸被在碱性条件下形成氢氧化铵，再与纳 氏试剂中的碘化钾求复盐作用形成碘化双象铵，如试样中服酶活性消失，上述反应即不发生， NH:CONH 2H O(NH.) CO (NH ) CO 2NaOH---Na:CONH.OH 2K [Hgl ]3KOHNH --NH HgOI7K12H:O (黄棕色沉淀) 3试剂 3.11%尿素溶液， 3.210%酸销溶液. 3.32%酒石酸钾钠溶液. 3.45%硫酸， 3.5中性缓冲液：取0.067mol/L磷酸氧二钠溶液611mL 加人389mL0.067mol/L磷酸二氢钾溶 液混合均匀即可， 3.5 10.067mol/L磷酸氢二钠溶液：称取无水磷酸氢二钠9.47g溶解于1000mL水中， 3.5.20.067mol/1.磷酸二氢钾溶液：称取磷酸二氢钾9.07g溶于1000mL水中即成. 3.6纳氏试剂：称取红色化求(Hgl2)55g 确化钾41.25g溶于250mL水中，溶解后，倒人1000mL 容量瓶中，再称取氢氧化纳144g 溶于500mL.水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒入以上1000mL容 量瓶中，加水至刻度，把匀后倒入试剂瓶，静止后用上清液， 4分析步骤 4.1取10mL.比色管甲、乙两支，各加人0.1g试样，再各加1mL水，振摇半分钟（约100次），然后各 加人中性缓冲液1m 4 2向上两管中的甲管《试样管)中加人尿素溶液1mL. 再向乙管《空白对管)中加入1mL水，将 甲、乙两管摇匀置于40℃水浴中保温20min 4.3从水浴中取出二管后，各加4mL水，摇匀再加10%鸭酸钠溶液1mL 摇匀，再加5%酸1mL 匀过滤备用. 4.4取上述滤液2mL.分别加人25mL具塞纳氏比色管（配套管）中，再按下述步骤操作. 4 4.1各加水15mL后再加入2%酒石酸钾钠1mL. 4.4.2各加入纳氏试剂2mL.后再加水至25mL刻度， 4.5摇匀后观察结果（见表1）. 477 ...
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