KJ 食品快速检测方法 KJ202202 豆芽中甲硝唑的快速检测 胶体金免疫层析法 2022-12-05发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202202 豆芽中甲硝唑的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了豆芽中甲硝唑的快速检测胶体金免疫层析法. 本方法适用于绿豆芽、黄豆芽等豆芽中甲硝唑的快速定性测定. 2原理 本方法采用竞争抑制免疫层析原理.样品中甲硝唑经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑 制抗体和检测线(T线)上抗原的结合，从而导致检测线(T线)颜色深浅的变化.通过检测线(T线)与 控制线(C线)颜色深浅比较，对样品中甲硝唑进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CHOH). 3.1.2盐酸(HCl 37%). 3.1.3三羟甲基氨基甲烷(C4HNOa) 即Tris碱. 3.2试剂配制 3.2.1盐酸溶液(2mol/L):量取盐酸(3.1.2)16.7mL 用水稀释至100mL. 3.2.2提取液(pH=8.0 0.1mol/L):称取12.1 g Tris碱(3.1.3)，加约900mL水溶解，混匀，用盐酸溶 液(3.2.1)调节pH至8.0，用水定容至1L. 3.3标准品 甲硝唑(CHN3O3 CAS号：443-48-1)：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准 物质. 3.4标准溶液配制 3.4.1甲硝唑标准储备液(1000μg/mL):准确称取甲硝唑标准品(3.3)10mg 用甲醇(3.1.1)溶解，全 部转移至10mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1000g/mL的标准储备液.一18℃及 以下避光保存，有效期6个月. 3.4.2甲硝唑标准中间液(10μg/mL):准确移取甲硝唑标准储备液(3.4.1)100μL置于10mL容量瓶 中，用甲醇(3.1.1)定容至刻度，摇匀，配制成浓度为10g/mL的标准中间液.一18℃及以下避光保 存，临用现配. 3.4.3甲硝唑标准工作液(100μg/L):准确移取甲硝唑标准中间液(3.4.2)100L置于10mL容量瓶 1 KJ202202 中，用甲醇(3.1.1)定容至刻度，摇匀，配制成浓度为100μg/L的标准工作液，临用现配. 3.4.4标准溶液为外部获取时，管理及使用应符合相关规定. 3.5材料 甲硝唑胶体金免疫层析试剂盒：一般包含金标微孔、试纸条或检测卡等. 4仪器和设备 4.1电子天平：感量分别为0.0001g和0.1g. 4.2移液器：200uL、1mL、5mLa 4.3离心机：转速≥4000r/min. 4.4涡旋混合器. 4.5pH计：测量精度0.02pH单位. 4.6孵育器. 4.7胶体金读数仪（可选）. 5环境条件 环境温度10℃~30℃. 6分析步骤 6.1试样制备 取约500g具有代表性的样品，将其剪碎成0.5cm~1cm长度的小段，均分成两份，分别装入洁净 容器中作为试样和留样，密封，标记.留样置于一18℃及以下保存. 6.2试样提取 称取2g(精确至0.1g)试样(6.1)于15mL离心管中，加入3mL提取液(3.2.2)，涡旋振荡1min 4000r/min离心2min 上清液即为待测液. 6.3测定步骤 缓慢滴加上述待测液100uL至检测卡加样孔中，静置反应4min 在8min内对结果进行判定. 6.4质控试验 每批快检试剂应同时进行空白试验和阳性质控试验. 6.4.1空白试验 称取空白试样，按照6.2和6.3步骤与试样同法操作. ...
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