KJ 食品快速检测方法 KJ202204 蔬菜水果中水胺硫磷的快速检测 胶体金免疫层析法 2022-12-05发布 国家市场监督管理总局 发布 KJ202204 蔬菜水果中水胺硫磷的快速检测 胶体金免疫层析法 1范围 本方法规定了蔬菜水果中水胺硫磷的胶体金免疫层析快速检测方法. 本方法适用于仁果类、柑橘类、豆类、叶菜类等蔬菜水果中水胺硫磷的快速定性测定. 2原理 本方法采用胶体金竞争抑制免疫层析原理.样品中的水胺硫磷经提取后与胶体金标记的特异性抗 体结合,抑制抗体和检测线(T线)上抗原的结合,从而导致检测线颜色深浅的变化.通过检测线(T线) 与控制线(C线)颜色深浅比较,对样品中水胺硫磷进行定性判定. 3试剂与材料 除另有规定外,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水. 3.1试剂 3.1.1甲醇(CHOH). 3.1.2氯化钠(NaC1). 3.1.3十二水合磷酸氢二钠(Na2HPO12H2O) 3.1.4二水合磷酸二氢钠(NaH2PO2H2O). 3.2试剂配制 样品提取液(0.1mol/L磷酸盐缓冲溶液):称取9g氯化钠(3.1.2)、6g十二水合磷酸氢二钠 (3.1.3)、0.4g二水合磷酸二氢钠(3.1.4),用水溶解并定容至200mLa 3.3标准品 水胺硫磷(CH1NOPS CAS号:24353-61-5):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书的 标准物质. 3.4标准溶液配制 3.4.1水胺硫磷标准储备液(1.0mg/mL):准确称取水胺硫磷标准品(3.3)10mg 用甲醇(3.1.1)溶解 后,全部转移至10mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀,配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液.一18℃ 及以下避光保存,有效期12个月. 3.4.2水胺硫磷标准工作液(10g/mL):准确移取水胺硫磷标准储备液(3.4.1)100uL置于10mL容 量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀释,定容至刻度,摇匀,配制成浓度为10g/mL的标准工作液.一18℃及以 下避光保存,有效期1个月. 3.4.3标准溶液为外部获取时,管理及使用应符合相关规定. 1 KJ202204 3.5材料 水胺硫磷胶体金免疫层析试剂盒:一般包含金标微孔、试纸条等. 4仪器和设备 4.1电子天平:感量分别为0.0001g和0.1g 4.2移液器:200uL、1mL、10mL. 4.3捣碎机. 4.4离心机:转速≥4000r/min(可选). 4.5涡旋混合器. 4.6孵育器. 4.7胶体金读数仪(可选). 5环境条件 环境温度10℃~30℃. 6分析步骤 6.1试样制备 参考GB2763一2021《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》表A.1取样方式进行取样, 取约10g具有代表性的样品,搅碎至匀浆状,分为两份分别装入洁净容器作为试样和留样,密封,标 记.留样置于一18℃及以下保存. 6.2试样提取 6.2.1仁果类水果 称取均质混匀的仁果类水果试样4g(精确至0.1g)于15mL离心管,加入4mL样品提取液(3.2), 涡旋振荡2min 静置分层或4000r/min离心1min 上清液即为待测液. 6.2.2柑橘类水果 称取均质混匀的柑橘类水果试样1g(精确至0.1g)于15mL离心管,加入2mL样品提取液(3.2), 涡旋振荡2min 静置分层或4000r/min离心1min 上清液即为待测液. 6.2.3蔬菜和其他水果 称取均质混匀的蔬菜和其他水果试样2g(精确至0.1g)于15mL离心管,加入8mL样品提取液 (3.2) 涡旋振荡2min...