ICS11.220 CCS B 41 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T1247-2022 代替NY/T1247一2006 禽网状内皮组织增殖症诊断技术 Diagnostic technique for avian reticuloendotheliosis 2022-07-11发布 2022-10-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T1247-2022 前言 本文件按照GB/T1.1-一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 本文件代替NY/T1247一2006《禽网状内皮增生病诊断技术》，与NY/T1247一2006相比，除结构调 整和编辑性修改外，主要技术变化如下： a)修改了培养病青用细胞系（见7.2.2）； b)增加了禽网状内皮组织增殖症病青逆转录聚合酶链反应检测方法（见第8章）. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出. 本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口. 本文件起草单位：山东农业大学、中国动物卫生与流行病学中心、山东益生种畜禽股份有限公司. 本文件主要起草人：崔治中、赵鹏、孙淑红、李阳、郭龙宗. 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为： -—2006年首次发布为NY/T1247一2006； 一一本次为第一次修订. I NY/T1247-2022 禽网状内皮组织增殖症诊断技术 1范围 本文件规定了禽网状内皮组织增殖症临床诊断、病分离培养与鉴定、间接免疫荧光试验、逆转录聚 合酶链反应检测方法、间接ELISA抗体检测方法的技术要求. 本文件适用于禽网状内皮组织增殖症诊断及鸡活体和病料组织中禽网状内皮组织增殖症病毒 (REV)的检测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件. GB19489实验室生物安全通用要求 NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1 禽网状内皮组织增殖症avian reticuloendotheliosis 由反转录病毒属的禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)感染多种禽类引起的一群病理综合征. 3.2 间接免疫荧光试验immunofluorescent assay;IFA 以细胞增殖的病毒为抗原，与特异抗体结合，再与荧光索标记第二抗体（抗抗体）结合，形成抗原抗 体抗抗体复合物，洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光. 3.3 酶联免疫吸附试验enzyme--linked immunosorbent assay;ELISA 将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定 性和定量检测方法. 4设备和材料 4.1冰箱：-20℃，一80℃. 4.2恒温培养箱：(36士1)℃. 4.3冷冻台式离心机（≥12000r/min). 4.4恒温水浴锅：(36士1)℃. 4.5摇床：(36士1)℃. 4.6CO2培养箱. 4.7正置荧光显微镜. 4.8SPF鸡隔离器. 4.9微量移液器及吸头(10L、100L和1000L). 4.10离心管(Ep管)：1.5mL、15mL.和50mL. 4.11细胞培养瓶(T25). 1 ...
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