ICS67.120.10 CCS X 22 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T4146-2022 动物源沙门氏菌分离与鉴定技术规程 Technical code of practice for isolation and identification of Salmonella from animals 2022-07-11发布 2022-10-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T4146—2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能涉及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出. 本文件由全国兽药残留与耐药性控制专家委员会归口. 本文件起草单位：中国兽医药品监察所、中国动物疫病预防控制中心. 本文件主要起草人：张纯萍、李颖、赵琪、叶子煜、宋立、刘洪斌、崔明全、蔡英华、徐士新、于娘、王鹤佳. I NY/T4146-2022 动物源沙门氏菌分离与鉴定技术规程 1范围 本文件规定了动物源沙门氏菌(Salmonella)的分离与鉴定方法. 本文件适用于动物直肠/泄殖腔拭子、新鲜粪便、肠道内容物等样品中沙门氏菌的分离和鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件， 仅注日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件. GB4789.4一2016食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室，生物安全通用要求 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. 4试剂或材料 4.1要求 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的三级水，培养基按附录A配制或 用商品化产品. 4.2试剂 4.2.1氯化钠. 4.2.2聚合酶链式反应预混液(2 XPCR Master Mix). 4.2.3琼脂糖. 4.2.4a氰-4-羟基肉桂酸(HCCA):色谱纯. 4.2.550XTAE缓冲液. 4.2.6甘油. 4.3溶液制备 4.3.1无菌生理盐水：取氯化钠8.5g 加水适量使溶解并稀释至1000mL 121℃高压灭菌15min. 4.3.2基质溶液：取a氰-4-羟基肉桂酸(HCCA) 按说明书配制或用市售商品. 4.3.3灭菌甘油：取丙三醇适量，121℃高压灭菌20min. 4.3.41×TAE缓冲液：取50XTAE缓冲液20mL. 加水定容至1000mL. 4.3.51.2%琼脂糖凝胶：取琼脂糖1.2g 于100m1.1×TAE中加热，充分溶解. 4.4培养基制备与缓冲溶液 4.4.1Cary-Blair氏运送培养基：按照附录A中A.1的规定执行. 4.4.2蛋白陈水缓冲液(BPW):按照A.2的规定执行. 4.4.3四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液：按照A.3的规定执行. 4.4.4亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液：按照A.4的规定执行. 4.4.5氯化镁孔雀绿(RV)增菌液：按照A.5的规定执行. 1 ...
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