ICS67.120.10 CCS X 22 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T4149-2022 动物源大肠埃希菌分离与鉴定技术规程 Technical code of practice for isolation and identification of Escherichia coli from animals 2022-07-11发布 2022-10-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T4149-2022 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 请注意本文件的某些内容可能莎及专利.本文件的发布机构不承担识别专利的责任. 本文件由农业农村部畜牧兽医局提出. 本文件由全国兽药残留与耐药性控制专家委员会归口. 本文件起草单位:中国兽医药品监察所、广东省农产品质量安全中心. 本文件主要起草人:张纯萍、吴荔琴、赵琪、刘佩怡、宋立、肖田安、崔明全、伍宏凯、徐士新、刘燕、 王鹤佳. I NY/T4149—2022 动物源大肠埃希菌分离与鉴定技术规程 1范围 本文件规定了大肠埃希菌(Escherichia coli)的分离与鉴定方法. 本文件适用于动物直肠/泄殖腔拭子、粪便拭子、肠道内容物拭子等样品中大肠埃希菌的分离和鉴定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于本 文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 NY/T1948兽医实验室生物安全要求通则 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. 4试剂或材料 4.1要求 除另有规定外,试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的三级水,培养基按附录A配制或 用商品化产品. 4.2试剂 4.2.1a氰-4-羟基肉桂酸(HCCA):色谱纯. 4.2.2甘油. 4.3溶液制备 4.3.1乳糖发酵管:按照附录A中A.1的规定执行. 4.3.2 Kovacs靛基质试剂:按照A.2的规定执行. 4.3.3甲基红试剂:按照A.3的规定执行. 4.3.4V-P试剂:按照A.4的规定执行. 4.3.5基质溶液:取a氰-4-羟基肉桂酸(HCCA) 按说明书配制;或用市售商品. 4.3.6灭菌甘油:取甘油适量,121℃灭菌20min. 4.4培养基制备 4.4.1 Cary-Blair氏运送培养基:按照A.5的规定执行. 4.4.2麦康凯琼脂:按照A.6的规定执行. 4.4.3营养琼脂:按照A.7的规定执行. 4.4.4蛋白胨水:按照A.8的规定执行. 4.4.5缓冲葡萄糖蛋白胨水:按照A.9的规定执行. 4.4.6西蒙氏柠檬酸盐培养基:按照A.10的规定执行. 4.4.75%蔗糖脱脂乳保护剂:按照A.11的规定执行. 4.5标准菌株 1 ...