GB/T18204.10-2000 前言 为贯彻执行《公共场所卫生管理条例》和GB9663~9673一1996、GB16153一1996《公共场所卫生标 准》，加强对公共场所卫生监督管理，特制定本标准.本标准中的方法是与GB9663~9673一1996、 GB16153一1996相配套的监测检验方法. 本标准第一法为仲裁法. 本标准为首次发布. 本标准由中华人民共和国卫生部提出. 本标准起草单位：天津市卫生防疫站、中国预防医学科学院环境卫生监测所、江苏省卫生防疫站、北 京市卫生防疫站、广东省卫生防疫站. 本标准主要起草人：张淑兰、陈西平、路金爽、封幼玲、高晖. 中华人民共和国国家标准 游泳池水微生物检验方法 大肠菌群测定 GB/T18204.10-2000 Methods of microbiological examination for water in swimming pool -Determination of Coliform bacteria 1范围 本标准规定了游泳池水大肠菌群的测定方法. 本标准适用于游泳池水大肠菌群的测定. 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文.本标准出版时，所示版本均 为有效.标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性. GB/T18204.2一2000公共场所茶具微生物检验方法大肠菌群测定 3定义 本标准采用下列定义. 大肠菌群coliform bacteria 指一群在36℃士1℃培养24h能发酵乳糖、产酸、产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆 菌. 第一法多管发酵法 4仪器 见GB/T18204.2一2000中第3章. 5培养基和试剂 5.1乳糖蛋白陈培养液 5.1.1成分：蛋白 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g 氯化钠 5g 1.6%(V/V)溴甲酚紫乙醇溶液1mL 蒸馏水 1000mL 三倍浓缩乳糖蛋白陈培养液按上述乳糖蛋白陈培养液浓缩三倍配制. 5.1.2配法：将蛋白陈、牛肉膏、乳糖及氯化钠置于1000mL蒸馏水中加热溶解，调H到7.2~7.4. 国家质量技术监督局2000-09-30批准 2001-01-01实施 GB/T18204.10-2000 再加人1mL1.6%溴甲酚指示剂，充分混匀，分装到含有倒管的试管中，115℃高压灭菌15min. 5.2伊红美兰琼脂 见GB/T18204.3一2000中第4章第2节. 5.3革兰氏染色液 见GB/T18204.3一2000中第4章第4节. 5.4染色法 见GB/T18204.3一2000中第4章第5节. 6推测性试验 6.1在2个装有50mL三倍浓缩乳糖胆盐培养液的大试管或烧杯内各加人水样100mL. 6.2在10支装有5mL三倍浓缩乳糖胆盐培养液的试管里各加人水样10mL. 6.3轻摇试管，使液体充分混匀，置36℃士1℃培养箱中，培养24h. 6.4观察每管是否产气，如不产气则报告为大肠菌群阴性；若有气体产生则为推测性试验阳性，需做进 一步的证实试验. 7证实试验 7.1平板分离 自推测性检验阳性管中取一接种环培养液，接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36℃士1℃培养箱培养 18~24h 观察菌落形态，典型的大肠菌群菌落为黑紫色或红紫色，具有金属光泽. 7.2复发酵试验 挑取可疑大肠菌群菌落1或2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，于36℃士1℃培养箱中， 培养24h. 7.3凡乳糖发酵管最终产酸、产气，革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，为大肠菌群阳性.记下证实试验 的阳性管数，查总大肠...
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