GB 5009.299-2024 食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定.pdf

中华人民共和国,乳铁蛋白,磷酸盐缓冲液,缓冲液,食品安全,食品安全标准,其他规范
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GB 中华人民共和国国家标准 GB5009.299—2024 食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定 2024-02-08发布 2024-08-08实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局 发布 GB5009.299-2024 食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定 1范围 本标准规定了食品中乳铁蛋白的高效液相色谱测定方法. 本标准适用于巴氏杀菌乳、调制乳、含乳饮料、调制乳粉及乳基婴幼儿配方食品中牛乳铁蛋白含量 的测定. 本标准不适用于风味发酵乳、豆基婴幼儿配方食品中牛乳铁蛋白的测定. 2原理 试样中的牛乳铁蛋白经磷酸盐缓冲液提取,肝素亲和柱富集净化后,反相高效液相色谱柱分离,紫 外检测器于280nm处检测,外标法定量. 3试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水. 3.1试剂 3.1.1乙腈(CHCN):色谱纯. 3.1.2三氟乙酸(CF3CO2H):色谱纯. 3.1.3氯化钠(NaC1). 3.1.4磷酸(H3PO4). 3.1.5磷酸氢二钠(Na2HPO4). 3.2试剂配制 3.2.1磷酸盐缓冲液I:称取7.1g磷酸氢二钠、58.4g氯化钠,加900mL水溶解,用磷酸调H至8.0 士0.2,加水定容至1000mL 临用现配. 3.2.2磷酸盐缓冲液Ⅱ:称取28.4g磷酸氢二钠,加900mL水溶解,用磷酸调pH至7.5士0.2,加水定 容至1000mL 临用现配. 3.2.30.1%三氟乙酸溶液:量取1mL三氟乙酸注入900mL水中,用水稀释至1000mL 过0.45μm 滤膜. 3.3标准品 牛乳铁蛋白标准品(CAS号:146897-68-9):纯度≥95%,铁含量≤35mg/100g 或经国家认证并授 予标准物质证书的标准品. 注:标准品可以使用满足溯源要求的商品化标准溶液. 3.4标准溶液配制 3.4.1牛乳铁蛋白标准储备溶液(5.0mg/mL):称取50mg(精确至0.1mg)牛乳铁蛋白标准品用水溶 解,转移至10mL容量瓶并定容至刻度,混匀,0℃~4℃条件下保存,可保存3个月. 3.4.2牛乳铁蛋白标准中间溶液(0.50mg/mL):吸取1.0mL牛乳铁蛋白标准储备溶液,用磷酸盐缓 1 GB5009.299-2024 冲液I定容至10mL 临用现配. 3.4.3牛乳铁蛋白标准系列工作溶液:准确移取上述牛乳铁蛋白标准中间溶液,用磷酸盐缓冲液1稀 释定容,配制成浓度分别为1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL和 200.0μg/mL的标准系列工作液,临用现配. 3.5材料 3.5.1肝素亲和柱:1mL 柱容量≥2mg 或性能相当者(验证方法见附录B). 注:使用不同厂商的肝素亲和柱,在样品提取、上样、淋洗和洗脱的操作方面可能会略有不同,应根据肝素亲和柱特 点进行优化. 3.5.2滤膜,水相,0.45μm. 3.5.3水相针头滤器:聚醚砜材质,0.45m. 4仪器和设备 4.1高效液相色谱仪:配有紫外检测器或相当者. 4.2天平:感量分别为0.01g和0.1mg. 4.3冷冻离心机:4℃,转速≥10000r/min. 4.4pH计:精度为0.01. 4.5涡旋振荡器. 4.6恒温水浴锅. 4.7固相萃取柱装置. 5分析步骤 5.1样品前处理 5.1.1试样制备 取有代表性的样品至少200g 液态样品摇匀后储存于容器中作为试样,于0℃~4℃保存,备用; 固态样品混匀后储存于容器中作为试样,常温下干燥保存,备用. 5.1...

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