ICS67.050 CCS X83 TB 中国营养保健食品协会团体标准 T/CNHFA131—2023 斑马鱼模型用于保健食品辅助降血脂功能的 筛查方法 Screening Method for Auxiliary Lipid-lowering Function of Health Food with Zebrafish Model 2023-05-30发布 2023-06-01实施 中国营养保健食品协会发布 T/CNHFA131-2023 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规 则》的规定起草. 本文件由杭州环特生物科技股份有限公司提出, 本文件由中国营养保健食品协会归口. 本文件起草单位:杭州环特生物科技股份有限公司、北京东方红航天生物技术股份有 限公司、东阿阿胶保健品有限公司、漳州片仔癀药业股份有限公司、广西壮族自治区亚热 带作物研究所、浙江养生堂天然药物研究限公司、广东太阳神集团有限公司、新时代 健康产业集团、云南云科特色植物提取实验室有限公司、广东青云山药业有限公司、浙江 方格药业有限公司、健合(中国)有限公司、华熙生物科技股份有限公司、黑龙江飞鹤乳 业有限公司、完美(广东)口用品有限公司、云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司、中 食都庆(山东)生物有限公司、首都医科大学附属北京中医医院、北京市药品检验研究院、 上海疾控中心. 本文件主要起草人:朱晓宇、徐懿乔、谢瑶、孙阳恩、陈志亮、檀小辉、唐秀观、张 正方、刘婷婷、史珅、杨怡雯、缪着、徐霄龙、范妙璇、杨文良、洪新宇. 1 T/CNHFA131-2023 斑马鱼模型用于保健食品辅助降血脂功能的筛查方法 1范围 本文件规定了采用斑马鱼模型对保健食品降血脂功能的筛查方法. 本文件不适用于筛查不能溶解、乳化或制备成均匀分散的悬浮液的受试样品, 2规范性引用文件 GB/T39649实验动物实验鱼质量控制 GB/T21807化学品鱼类胚胎和卵黄囊仔鱼阶段的短期毒性试验术语和定义试验溶液 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. 3.1斑马鱼Zebrafish 脊椎动物,生物分类学上属于脊椎动物门、硬骨鱼纲、鲤鱼目、鲤科、斑马鱼属、斑 马鱼种,可用于教学和科研的模式动物. 3.2受精后天数Day(s)Post-fertilization dpf 受精卵受精后的天数. 3.3无可观察效应浓度No Observed Toxic Effect Concentration.NOEC 与模型对照相比,对试验生物术产生显著毒性效应的最高受试样品浓度. 4原理 通过饲喂斑马鱼高糖高脂饲料(葡荷糖和蛋黄粉)形成脂代谢紊乱斑马鱼模型,同 时给予斑马鱼受试样品,可检测受试样品对高廿油三酯血症和高胆固醇血症的影响,并可 判定受试样品对脂质的吸收、脂蛋白的形成、脂质的降解或排泄产生的影响.本试验用油 红对斑马鱼汕二酯进行染色,用体视显微镜拍摄斑马鱼尾静脉并用图像处理软件计算 光密度总和,光密度总和斑马鱼体内的甘油三酯含量正相关,甘油三酯含量越高,光 密度总和越大;用胆固醇荧光探针对斑马鱼胆固醇进行染色,用荧光显微镜拍摄斑马鱼尾 静脉并用图像处理软件计算荧光强度总和,荧光强度总和与斑马鱼体内胆固醇的含量呈正 相关,胆固醇含量越高,荧光越强.根据斑马鱼体内甘油三酯、旧固醇的含量来判定受试 样品是否具有辅助降甘汕二酯或辅助降胆固醇功能、 2 ...