ICS65.020.30 B44 中国实验动物学会团体标准 T/CALAS95—2020 实验动物”"肝螺杆菌环介导等温扩增 (NCOR)检测方法 Laboratory animal-Detection of Helicobacter hepaticus by loop-mediated isothermal amplification 4242-34-23”发布”M甲NN4243-23-23”实施” 中国实验动物学会发布 前言 本文件按照GB/T1.1一2020给出的规则起草. 本文件附录A为资料性附录. 本文件由中国实验动物学会归口. 本文件由全国实验动物标准化技术委员会(SAC/TC281)技术审查. 本文件由中国实验动物学会实验动物标准化专业委员会提出并组织起草. 本文件起草单位：上海实验动物研究中心、扬州大学. 本文件主要起草人：冯洁、张泉、谢建芸、高诚、朱立麒、钱森. 实验动物肝螺杆菌环介导等温扩增 (LAMP)检测方法 1范围 本文件规定了实验动物肝螺杆菌LAMP检测方法. 本文件适用于实验动物肝螺杆菌的检测. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.凡是注明日 期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准.凡是不注日期的引用文件，其最新版本 (包括的修改单)适用于本文件. GB19489 《实验室生物安全通用要求》 GB/T19495.2《转基因产品检测实验室技术要求》 3术语、定义和缩略语 下列术语、定义和缩略语适用于本文件. 3.1 环介导等温扩增loop-mediated isothermal amplification LAMP 一种新型核酸扩增方法.针对靶基因上的6个区域设计2对特异引物，在链置换DNA 聚合酶(Bst DNA polymerase)的作用下，以特异性引物为延伸起点，于60℃~65℃恒温 扩增.可在15min~60min内实现10~101倍的核酸扩增，扩增产物由一系列复杂的大 小不等的DNA混合而成. 3.2缩略语 DNA脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid) LAMP环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification) PBS 磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline) flaB鞭毛蛋白B(flagellin B)基因 4基本原理 采用合适的方法提取检测样本中的细菌DNA.根据肝螺杆菌属flaB基因序列保守区 域设计一组LAMP引物，包括外引物F3和B3、内引物FIP和BIP以及环引物LB 对DNA 模板进行扩增，根据LAMP扩增结果判定样品中是否含有肝螺杆菌. 设计的LAMP扩增引物包括外引物F3和B3、内引物FP和BIP以及环引物LB ...
T/CALAS 95-2020 实验动物 肝螺杆菌环介导等温扩增（LAMP）检测方法.pdf
