附件3 妇舒丸中牛皮源成分检查项补充检验方法 (BJY201921) 【检查】牛皮源成分照高效液相色谱法（中国药典2015年 版通则0512)和质谱法（中国药典2015年版通则0431）测定. 色谱、质谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂（色谱柱内径2.1mm);以乙腈为流动相A 以0.1% 甲酸溶液为流动相，按下表中的规定进行梯度洗脱，流速为每 分钟0.3ml;采用质谱检测器，电喷雾正离子模式(ESI) 多反 应监测(MRM) 选择m/z641.3(双电荷)→726.2和m/z641.3 (双电荷)→783.3作为检测离子对.取牛皮源成分参比溶液， 进样5ul 按上述离子对测定的MRM色谱峰的信噪比均应大于 10:1. 时间（分钟）流动相A(%) 流动相B(%) 0~25 5→20 95→80 25~40 20→50 80→50 牛皮源成分参比溶液的制备取黄明胶对照药材0.1g 精密 称定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液40ml 超声处理30 分钟，加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，摇匀.精密量取上述溶 液5ml 置100ml量瓶中，加阿胶基质溶液（取阿胶对照药材粉 末0.1g 精密称定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液40ml 1— 超声处理30分钟，加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，摇匀，即得) 稀释至刻度，摇匀，用0.22um微孔滤膜滤过，取续滤液100ul 置微量进样瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析级胰蛋白酶，加 1%碳酸氢铵溶液制成每1ul中含1ug的溶液，临用新制)10ul 摇匀，37℃恒温酶解12小时，即得. 供试品溶液的制备取本品适量研细，取约含阿胶0.1g的供 试品，置50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液40ml 超声30分钟， 加1%碳酸氢铵溶液稀释至刻度，摇匀，自“用0.22um微孔滤膜 滤过”起，照牛皮源成分参比溶液的制备方法同法操作，即得. 测定法分别吸取牛皮源成分参比溶液与供试品溶液各5ul 注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定，即得. 判定原则(1)供试品的提取离子流色谱中，未同时出现与 参比溶液色谱相应的色谱峰，视为未检出；(2)供试品的提取离 子流色谱中，同时出现与参比溶液色谱相应的色谱峰，且供试品 色谱中m/z641.3(双电荷)→726.2的色谱峰面积值不大于参比 溶液中相应的峰面积值者，视为未检出；(3)供试品的提取离子 流色谱中，同时出现与参比溶液色谱相应的色谱峰，且供试品色 谱中m/z641.3(双电荷)→726.2的色谱峰面积值大于参比溶液 中相应的峰面积值者，视为检出. 结果判定供试品的提取离子流色谱中，应不得检出与参比 溶液色谱相应的色谱峰. 起草单位：广东省药品检验所 复核单位：湖北省药品监督检验研究院 一 2 一 ...
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