3.2乙腈，色谱纯； 3.3甲酸，色谱纯； 3.4氯化钠. 3.5饱和氯化钠溶液：称取40g氯化钠，置于250mL磨口 锥形瓶中，加入100mL水，超声15分钟，即得. 3.6含0.5%甲酸的乙腈溶液：量取200mL乙腈于500mL容 量瓶中，加入2.5mL甲酸，用乙腈稀释并定容至刻度，摇匀. 3.75mmol乙酸铵缓冲溶液(pH4.0):称取0.3854g乙酸铵 于1000mL容量瓶中，加水980mL溶解后，用甲酸调节pH至 4.0 加水定容至刻度，混匀，过0.22um微孔滤膜. 3.8氯霉素标准储备溶液[p(氯霉素)=1.0mg/mL]:精确称 取10mg(精确至0.01mg)的氯霉素对照品，置10mL棕色容量 瓶中，加入甲醇(3.1)充分溶解后，用甲醇(3.1)定容至刻度， 摇匀.该储备液质量浓度为1.0mg/mL.置于-18℃冰箱中贮存. 3.9其他组分标准储备溶液[p(待测组分)=0.1mg/mL]:分 别精确称取附表1中除氯霉素外其他待测组分对照品各10mg (精确至0.01mg)置于100mL棕色容量瓶中，加甲醇(3.1)使 溶解（对于溶解性差的物质可加入少量甲酸或水促进溶解），并 用甲醇(3.1)定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.1mg/mL的 标准储备溶液.置于-18℃冰箱中贮存. 3.10混合标准储备液：分别精确移取各待测组分标准储备溶 液(3.8和3.9)1.0mL于100mL容量瓶中，用甲醇(3.1)稀释 并定容至刻度，作为混合标准储备液.置于-18℃冰箱中贮存. 4仪器 4.1高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪. 2— 4.2分析天平：感量0.0001g和0.00001goo 4.3超声波清洗仪. 4.4冷冻离心机. 4.5涡旋混合仪. 5测定步骤 5.1筛查用混合标准溶液的制备 分别取混合标准储备液(3.10)适量，用初始流动相进行稀 释配制成氯霉素浓度为200ng/mL 其他组分浓度为20ng/mL的 筛查用混合标准溶液. 5.2基质标准工作溶液的制备 取与待测化妆品配方相同或相近的基质空白样品5份于 15mL离心管中(0.2g/份)，分别加入标准品储备溶液适量，按 照样品处理操作步骤处理，配制成氯霉素浓度为200、400、600、 800、1000ng/mL 其他组分浓度为20、40、60、80、100ng/mL的 系列溶液（浓度范围可根据实际情况进行调整） 5.3样品处理 准确称取化妆品样品（实际样品或空白样品）0.2g(精确到 0.0001g) 置于15mL离心管中，准确加入3mL饱和氯化钠溶液 (3.5) 涡旋30s 分散均匀，加入含0.5%甲酸的乙腈溶液(3.6) 5mL 涡旋30s 超声提取30min 涡旋混合摇匀，以8000r/min 转速0℃冷冻离心5min 吸取上清液于10mL容量瓶中，加水定 容至10mL 混匀，经0.22um滤膜过滤后，滤液作为供试品溶 液备用. 5.4仪器参考条件 5.4.1色谱条件 色谱柱：C1:柱(100mmx2.1mm 1.7um)或等效色谱柱； -3 流动相：溶液A:5mmol乙酸胺缓冲溶液pH4.0(3.7) 溶 液B:乙腈（含0.1%甲酸），梯度洗脱程序见表1； 表1流动相的梯度洗脱程序 时间(min) 溶液A(%) 溶液B(%) 0 98 2 14 1 99 17 1 99 17.1 98 2 20 98 2 流速：0.3mL/min; 柱温：40℃； 进样量：5uL. 5.4.2质谱参考条件 离子源：电喷雾离子源(ESI源)； 监测模式：正离子、负离子多离子反应监测模式，监测离子 对及相关参数设定见附表3（可根据仪器情况调整）； 0-2min:不进入质谱仪分析，2-20min:进入质谱仪分析. 5.5定性判定 取供试品溶液与相应标准品溶液，在相同试验条件下测定， 样品中如呈现定量离子对和定性离子对的色谱峰，被测组分的特 征离子峰保留时间与标准溶液对应的保留时间一致，且选择的定 性离子的相对丰度比与相当浓度对照品溶液的定性离子的相对 丰度比的最大偏差应不超过表2的规定，则可以判定样品中存 在对应的抗感染类药物成分. 4 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度(k) k>50% 50%≥k>20% 20%≥k>10% k<10% 允许的最大偏差 20% 125% 30% 土50% 5.6定量测定 取基质标准工作溶液依次测定，以待测组分的系列浓度为横 坐标，待测组分的峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立基质标 准曲线，其线性相关系数应不小于0.99.取供试品溶液测定， 将对应的定量离子色谱峰面积代入线性回归方程，按“计算”项下 公式，计算样品中各组分的含量. 6计算 错误！未找商用源XADX V X D m 式中：0——化妆品中的抗...
化妆品中抗感染类药物的检测方法.pdf
