ICS13.060.01 CCS Z16 团 体 标准 T/SATA070—2024 水中拟柱孢藻毒素的测定酶联免疫吸附法 Determination of Cylindrospermopsin in water Enzyme linked immunosorbent assay 2024-04-17发布 2024-05-17实施 深圳市分析测试协会 发布 T/SATA070—2024 目次 前言 .....II 1范围..... .1 2规范性引用文件 .1 3术语和定义， ..1 5试剂与材料. 1 6仪器和设备......... 1 ..1 7.1样品的采集. 1 7.2样品的保存..... 1 7.3试样的制备... 7.4空白试样的制备.. 2 8分析步骤.. 2 8.1仪器参考条件 2 8.2校准.. 2 8.3测定...... 2 9结果计算与表示， . 2 9.1定量分析. 2 9.2结果表示. 2 10检出限和测定下限 2 11精密度和准确度..... 3 11.1精密度和准确度.......... 3 11.2准确度............... 3 12质量保证和质量控制.... 3 12.1空白试验.... 3 12.2校准曲线， ..3 12.3连续校准.. 3 12.4平行样的测定....... 3 12.5基体加标... ...3 12.6阳性对照质控样品的测定 3 13废物处理 3 I T/SATA070—2024 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 请注意拟柱孢藻毒素属有毒有机物，实验操作过程应按规定要求佩戴防护器具，避免接触皮肤和衣 物. 本文件由深圳市分析测试协会提出并归口. 本文件起草单位：广东粤海水务检测技术有限公司、广东粤海水务股份有限公司. 本文件主要起草人：路晓锋、杨颖、郭瞻宇、彭俊翔、游文丹、王庆生、何振乾、王樊、黄俊能、 吴凡、黄子其、陆心卉、韦雪柠、陈桂畅、戴欢、吴金鑫、黄慧星、龙庆平、冯国仁、文金丽、郑开云、 杨创涛、彭鹭、李秀虹. II T/SATA070—2024 水中拟柱孢藻毒素的测定酶联免疫吸附法 1范围 本文件提供了测定水中拟柱孢藻毒素的酶联免疫吸附法. 本文件适用于地表水中拟柱孢藻毒素的测定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 H91.2-2022地表水环境质量监测技术规范 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义. 4方法原理 通过特异性抗体来识别检测拟柱孢藻毒素，加入底物后产生颜色反应，样品中的拟柱孢藻毒素浓度 与吸收光强度成反比，于波长450nm处测量吸光度. 5试剂与材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为符合GB/T6682标准的一 级水. 5.1拟柱孢藻毒素检测试剂盒. 6仪器和设备 6.1酶标仪：具有450nm波长模块. 6.2水浴锅：可调节温度至37℃. 6.3冰箱：可调节温度至-20℃. 6.4实验器皿：操作过程中涉及的器皿应清洗干净后晾干（注：清洗过程避免使用洗衣粉洗涤， 因洗衣粉可能含有荧光增白剂，对荧光实验结果会造成影响). 7样品 7.1样品的采集 参照HJ91.2-2022的相关规定采样，用预先洗干净并干燥的磨口玻璃瓶采集水样. 7.2样品的保存 采集的水样在-20℃下保存，5天内完成分析. 7.3试样的制备 1 T/SATA070—2024 取地表水样品50mL 经两次反复冻融处理，其中冷冻温度-20℃，水浴温度37℃，再从中取1mL 冻融后的样品，经5000rpm离心5min 离心后取50uL样品直接检测. 7.4空白试样的制备 以实验用水代替样品，按照试样制备(6.3)相同操作步骤，制备空白试样. 8分析步骤 8.1仪器参考条件 检测波长450nm 振荡时间3s 8.2校准 8.2.1校准曲线的绘制 配制6个浓度点的标准系列，标准系列浓度为0.05、0.10、0.25、0.50、1.00和2.00μg/L. 以标准系列溶液中拟柱孢藻毒素浓度的对数值为横坐标，以仪器读取的吸光度值与空白浓度下的吸 光度值的比值百分比为纵坐标，建立校准曲线. 8.3测定 8.3.1试样测定 取待测样品(6.3)，按照与绘制校准曲线相同的仪器分析条件进行测定. 8.3.2空白试验 按照与试样测定(7.3.1)相同的操作步骤进行空白试样(6.4)的测定. ...
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