ICS13.060.01 CCS Z16 团 体 标准 T/SATA071—2024 水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌 群的测定荧光检测法 Determination of total coliform Escherichia coli and fecal coliform in water Fluorescence assay 2024-04-17发布 2024-05-17实施 深圳市分析测试协会 发布 T/SATA071-2024 目次 前言 ...II 1范围... ....1 2规范性引用文件 .1 3术语和定义， ..1 5试剂与材料. 1 6仪器和设备........ 2 2 7.1样品的采集. 2 7.2样品的保存..... 2 7.3试样的制备.. 2 7.4空白试样的制备..... 2 8分析步骤... 3 8.1试样测定............. .........3 8.2空白试验... 3 8.3阳性和阴性对照试验.，. 3 9结果计算与表示， 9.1定量分析... 3 9.2结果表示.... 3 10质量保证和质量控制.3 10.1空白试验.... 3 10.2平行样的测定...... 4 10.3质控样品的测定. 10.4培养基的质量检验... 4 10.5菌株保存 . 4 11废物处理. I T/SATA071—2024 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草. 请注意本标准可能涉及某些有危险性的材料、操作和设备，但是并未对与此有关的安全问题都 提出建议.因此，使用者在应用本标准前应建立适当的安全和防护措施，并确定相关规章限制的适用性. 本文件由深圳市分析测试协会提出并归口. 本文件起草单位：广东粤海水务检测技术有限公司、广东粤海水务股份有限公司. 本文件主要起草人：路晓锋、杨颖、彭俊翔、游文丹、郭瞻宇、王樊、黄俊能、吴凡、黄子其、陆 心卉、韦雪柠、陈桂畅、戴欢、吴金鑫、黄慧星、龙庆平、冯国仁、王庆生、何振乾、文金丽、郑开云、 杨创涛、彭鹭、李秀虹、陈诚、吴国秋、曾惠、卢鹏澄、潘明茗、甘林林. II T/SATA071-2024 水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌群的测定荧光检测法 1范围 本文件提供了测定水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌群的荧光检测法. 本文件适用于地表水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌群的测定. 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件. GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 HJ91.2-2022地表水环境质量监测技术规范 GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导 H494水质采样技术指导 3术语和定义 H1001-2018界定的术语和定义适用于本文件. 3.1 总大肠菌群total coliforms 在37℃培养能产生B-半乳糖苷酶，分解选择性培养基中的邻硝基苯-B-D-吡喃半乳糖苷生成黄色 的邻硝基苯酚的肠杆菌科细菌. [来源：HJ1001-2018 3.1] 3.2 大肠埃希氏菌escherichia coli 俗称大肠杆菌，在37℃培养能产生B-半乳糖苷酶，分解选择性培养基中的邻硝基苯-B-D-吡喃半 乳糖苷生成黄色的邻硝基苯酚，同时产生B-葡萄糖醛酸酶，分解选择性培养基中的4-甲基伞形酮-B-D- 葡萄糖醛酸苷释放出荧光物质的肠杆菌科细菌. [来源：HJ1001-2018 3.3] 3.3 粪大肠菌群fecal coliforms 又称耐热大肠菌群(thermotolerant co1 iforms).在44.5℃培养能产生B-半乳糖苷酶，分解选 择性培养基中的邻硝基苯-B-D-吡喃半乳糖苷生成黄色的邻硝基苯酚的肠杆菌科细菌. [来源：HJ1001-2018 3.2] 4方法原理 使用试剂盒进行总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌群的检测，利用试剂盒中酶底物培养基，一 定量的水样与培养基混合均匀放置于适宜温度下（总大肠菌群和大肠埃希氏菌37℃士1℃、粪大肠菌群 44.5℃士0.5℃)环境下，当细菌生长时，可利用乳糖发酵产酸产气，产生特定的酶，并水解不同的底 物生成荧光物质，依据待测水样荧光强度变化与水中的总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌群数成一 定关系的原理，从而得出总大肠菌群、大肠埃希氏菌和粪大肠菌群浓度. 5试剂与材料 1 T/SATA071-2024 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为符合...
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