B39 ICS 65.020 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1842-2010 人参皂苷的测定 Determination of ginsenosides in ginseng 2010-05-20发布 2010-09-01实施 中华人民共和国农业部发布
NY/T1842-2010 前言 本标准的附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。
本标准起草单位：农业部参茸产品质量监督检验测试中心。
本标准主要起草人：陈丹、李月茹、侯志广、王艳梅、初丽伟、潘浦群、宋桂茹。
NY/T 1842-2010 人参皂苷的测定 1范围 本标准规定了测定人参中9种人参皂苷的高效液相色谱方法。
2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T15517.1模压红参分等质量标准 3原理 试样经乙醚脱脂后，用甲醇索氏提取，提取后的样液用SPEC：柱净化，利用高效液相色谱仪（紫外 检测器)对试样中的9种人参皂苷进行分离和测定，外标法定量。
4试剂和材料 除非有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的一级水。
4.170%乙醇溶液：取700mL无水乙醇，用去离子水稀释至1000ml。
4.2甲醇：色谱纯。
4.3乙醚。
4.4人参皂苷标准品：Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、Rf(含量98%）。
4.5标准混合溶液：逐一准确称取0.183g Re、0.163gRg1、0.102gRf、0.102gRg2、0.255gRbl、 量瓶中，用甲醇定容，配制成质量浓度为1.8g/L、1.6g/L、1.0g/L、1.0g/L、2.5g/L、3.0g/L、3.6g/L、 4.0g/L和2.1g/L的混合标准溶液，贮存在一18℃以下冰箱中，有效期6个月。
5仪器 5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。
5.2电子天平：感量为0.001g。
5.3电子天平：感量为0.0001g。
5.4旋转蒸发仪。
5.5索氏提取器。
5.6控温水浴。
5.7循环水多用真空泵。
5.8粉碎机。
5.9样品筛：孔径0.25mm。
NY/T 1842-2010 5.10SPECis小柱：1000 mg填料，6mL。
5.11微量进样器：5μL～50μL。
6试样制备 按GB/T15517.1--1995中6.3的规定执行。
7分析步骤 7.1样品提取 残渣中乙醚挥干后，再加人甲醇回馏8h。
7.2样品净化 7.2.1SPEC8柱的预处理 先用20mL去离子水淋洗SPECa柱，然后用20mL的甲醇进行活化，再用20mL去离子水平衡。
待水与柱筛板近平时上样。
7.2.2提取液的处理 提取液在60℃水浴条件下，经旋转蒸发仪减压浓缩至近干，氮气吹干，加入4mL去离子水充分摇 匀。
取2mL注入预先活化好的SPECs柱中，待液面与柱筛板近平时，倒人10mL去离子水淋洗SPE C&柱，弃去流出液，待淋洗液液面与柱筛板近平时，加人25mL乙醇溶液（4.1)洗脱SPECs柱.收集洗 脱液于50mL刻度试管中，氮气吹至25mL以下，用甲醇定容至25mL，混匀后，用0.2um滤膜过滤，待 测。
7.3测定 7.3.1仪器参考条件 7.3.1.1色谱柱：Cig(4.6mm×300mmX0.5μm)或相当者。
7.3.1.2流动相：甲醇十水。
7.3.1.3柱温：47℃。
7.3.1.4流速:0.5mL/min~0.8mL/min。
7.3.1.5检测波长：202nm。
7.3.1.6进样量：10μL。
7.3.1.7梯度洗脱程序见表1。
表1梯度洗脱程序 时间 甲醇 流速 min % mL/min 0~20 52 0.5 20~23 52~57 0.5~0.8 23~36 57 0.8 36~39 57~65 0.8 39~71 65 0.8 71~74 65~52 0.8~0. 5 74~84 52 0.5 7.3.2标准曲线的绘制 用混合皂苷标准工作液（4.5)按着梯度洗脱程序进行分析。
准确吸取0mL、2mL、4niL、6mL、 2
NY/T 1842--2010 8mL、10mL混合皂苷标准溶液（4.5)，分别置于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，准确吸取10pL 各容量瓶中的标准溶液，...
