GB/T 26426-2010 饲料中副溶血性弧菌的检测.pdf

ICS 65.120 B46 中华人民共和国国家标准 GB/T 26426-2010 饲料中副溶血性弧菌的检测 MethodfordeterminationofVibrioparahaemolyticusinfeeds (ISO/TS 21872-1:2007 Microbiology of food and animal feeding stuffs-- Horizontalmethodfor the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp.--Part 1:Detection of Vibrioparahaemolyticus and Vibriocholerae MOD) 2011-01-14发布 2011-07-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
GB/T26426-2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准使用重新起草法修改采用ISO/TS21872-1：2007《食品和动物饲料的微生物学潜在肠道 致病性弧菌属检测的水平方法第1部分：副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检测》英文版). TS21872-1：2007的章条编号对照一览表. 本标准与ISO/TS21872-1：2007相比存在技术性差异，这些差异涉及的条款已通过在其外侧页边 空白位置的垂直单线（）进行了标识，附录C中给出了相应技术性差异及其原因的一览表. 本标准还做了下列编辑性修改： --删除了ISO7937：2004的目次； -删除了ISO7937：2004的引言； 删除了ISO7937：2004的参考文献. 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口. 本标准起草单位：广东省微生物分析检测中心. 本标准主要起草人：朱红惠、孙晓棠、羊宋贞、黎志坤.
GB/T26426-2010 饲料中副溶血性弧菌的检测 1范围 本标准规定了饲料中副溶血性弧菌的检验方法. 本标准适用于饲料中副溶血性弧菌的检测. 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件. GB/T14699.1饲料采样(GB/T14699.1-2005 ISO6497：2002 IDT) GB/T20195动物饲料试样的制备（GB/T20195-2006 ISO6498：1998 IDT) 3原理 3.1概述 检测副溶血性弧菌包括4个步骤. 注：副溶血性弧菌可以少量存在，而且往往伴随着大量的其他弧菌或其他属的细菌.因此，要检测副溶血性弧菌， 连续两次选择性增菌是必要的. 3.2在选择性培养液中第一次增菌 称取25g试样加人到选择性培养液中，室温接种增菌培养基（碱性盐蛋白陈水，ASPW)，对于深度 冷冻的样品于37C培养6h±1h，对于新鲜的或干燥的样品于41.5C培养6h±1h. 3.3在选择性培养液中第二次增菌 吸取3.2获得的培养液重新接种新的增菌液ASPW管内，于41.5C培养18h±1h. 3.4分离 用3.2和3.3获得的培养液接种下面两种固体选择性培养基： 硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂（TCBS)； 一可选择另一适当的能检测副溶血性弧菌的固体选择性培养基，作为TCBS的补充. TCBS在37C培养24h士3h后检查结果.第二种选择性培养基按产品说明培养后检查结果. 3.5确证 转接3.4中分离的可疑菌落，培养纯化，然后通过适当的生化检验确证. 4稀释液、培养基及试剂 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，实验室用水采用蒸馏水或去离子水，或相当！ 1
GB/T26426-2010 纯度的水. 4.1增菌培养基：碱性盐蛋白陈水（ASPW)，参见附录A中的A.1. 4.2固体选择性分离培养基 4.2.1第一种培养基：硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂（TCBS)，参见附录A中的A.2. 4.2.2第二种培养基：科玛嘉弧菌显色培养基（CV)或大豆蛋白陈-三苯基氯化四氮唑琼脂（TSAT)， 两者可选择其一.严格按照厂商说明制备培养基. 4.3含盐营养琼脂（SNA)：参见附录A中的A.3. 4.4检测氧化酶试剂：参见附录A中的A.4. 4.5革兰氏染色液：参见附录A中的A.5. 4.6含盐三糖铁琼脂（TSI)：参见附录A中的A.6. 4.7检测鸟氨酸脱羧酶（ODC)含盐培养基：参见附录A中的A.7. 4.8检测赖氨酸脱羧酶（LDC)含盐培养基：参见附录A中的A.8. 4.9精氨酸双水解酶（ADH)含盐培养基：参见附录A中的A.9. 4.10检测β-半乳糖苷酶试剂：参见附录A中的A.10. 4.11检测吲哚含盐...