ICS 65.020.30 B 43 中华人民共和国国家标准 GB/T 25172-2010 猪常温精液生产与保存技术规范 Technical specification for production and preservation of fresh boar semen 2010-09-26发布 2011-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
GB/T25172-2010 前言 本标准的附录B、附录D为规范性附录,附录A、附录C为资料性附录. 本标准由中华人民共和国农业部提出, 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口. 本标准起草单位:青岛市畜牧兽医研究所、华南农业大学、北京养猪育种中心、胶南市家畜改良站. 本标准主要起草人:戈新、张守全、王建华、马振强、刘长宏、程明、孟庆利.
GB/T 25172-2010 猪常温精液生产与保存技术规范 1范围 本标准规定了猪常温精液生产与保存技术规范的精液采集、检查、稀释、分装、保存和运输. 本标准适用于猪的常温精液生产与保存. 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款.凡是注日期的引用文件,其随后 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然面,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准. NY/T65猪饲养标准 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准, 3. 1 原精液raw semen 采集后未经稀释的精液. 常温精液freshsemen 经稀释后在16℃~18℃下短期保存,仍具有受精能力的精液. 精子活力spermmotility 在37℃下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率. 3.4 精子密度spermconcentration 单位体积精液中的精子数,单位为10*个每毫升, 3.5 畸形精子占总精子数的百分率. 4精液采集 4.1公猪 应具有种用性能,符合国家有关规定,饲养应符合NY/T65的要求. 4.2采精室 应设置采精区和安全区,采精区设置假台猪,地面防滑,并保持清洁、安静. 4.3采精前准备 4.3.1采精员应着洁净工作衣、帽,穿长胶鞋. 4.3.2集精杯(内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸)、载玻片、盖玻片、精液处理器皿和 稀释液应预热至37℃. 1
GB/T 25172-2010 4.3.3显微镜载物台恒温板应预热至37℃.精子密度仪使用前应预热. 4.4采精步骤 4.4.1剪去包皮部长毛,清洁体表,擦干水渍. 4.4.2挤净包皮积液,先用0.1%高锰酸钾溶液清洗腹部和包皮,再用温水清洗后擦干. 4.4.3手握法采精时,应一只手戴双层无毒塑料手套,按率公猪包皮部,待公猪爬跨假台猪并伸出阴 茎,脱去外层手套,担紧龟头,使其不能旋转,顾势将阴茎的“S"状弯曲延直.另一只手持集精杯,弃去 最初射出的少量精液(约5mL),收集精液至射精完毕. 4.5采精频率 成年公猪每周采精两次至三次,青年公猪每周一次至两次. 5精液检查 5.1精液处理室 应设精液检查、稀释和分装区,温度宜控制在22C~25℃,不应太阳光直射或紫外灯照射.配置 仪器和用品参见附录A. 5.2原精液品质 原精液品质应符合表1的规定. 表1原精液品质 项 指标 外观 是乳白色,均匀一致 气球 略带湿味,无异味 采精量/mL ≥100 精子活力/% ≥70 精子密度/(10个/mL) ≥1 精子畸形率/% 18 细菌菌落数/(CFU/mL) ≤1×10 5.3检测方法 5.3.1外观、气味 目测、鼻唤. 5.3.2采精量 采用称量法计算采精量(1g相当于1mL). 5.3.3精子活力 取中层精液15μL~25uL,在200倍~400倍显微镜下检查.每份精液取样两次,每个样观察三个 视野,计算平均值. 5.3.4精子密度 采用精子密度仅或可见光分光光度计法测定.应定期用血细胞计数板法校正. 5.3.5精子畸形率 采用伊红或姬姆萨染色法检查时,在400倍~600倍显微镜下观察左、中、右三个视野中不少于 200个精子,也可采用相差显微镜直接观察,每两个月抽检一次. 5.3.6细菌菌落数 按GB4789.2规定执行.每两个月抽检一次. 2
GB/T 25172-2010 5.4记录 填写公猪精液品质检测登记表,登记表见附录B. 6精液稀释 6.1稀释液配制 6.1.1所用试剂均为分析纯,用双重蒸缩水溶解.配方参见附录C. 6.1.2商品稀释剂按说明书使用.不得使用过期或吸潮变色的稀释剂, 6.1.3自配稀释液配制后应及时加人抗生素,稀释液的pH为6.4~7.2. 6.1.4使用前1h配制,配制后应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人....