ICS65.020.01 CCS B38 T/SMSWYY 三明市生物医药及生物工程学会团体标准 T/004SMSWYY-2024 石斛新品种“粉佳人”种苗组培快繁技术 规程 Technical Regulations for tissue culture and rapid propagation of new Dendrobium variety“Fenjiaren" （报批稿） （本草案完成时间：2024.6.20） 在提交意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上.
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T/004 SMSWYY-2024 目次 前言 1范围.. 2规范性引用文件 3术语和定义， 3.1快繁rapid propagation. 3.2接种 inoculation. 3.3外植体explant.
3.4不定芽 adventitious bud 3.5 炼苗acclimatization. 4种苗繁有条件， 4.1接种室. 4.2培养室. 5组培生产流程， 5.1母株的确定 5.2外植体消毒 5.3诱导培养 5.4增殖培养 5.5生根培养 6炼苗与移栽 6.1炼苗 6.2洗苗 6.3基质准备 6.4移栽.
T/004SMSWYY-2024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
本文件由三明市生物医药及生物工程学会提出并归口.
本文件起草单位：三明市农业科学研究院、三明精农生物技术发展有限公司.
本文件主要起草人：颜沛沛、叶炜、江金兰、王培育、李尊文.
T/004SMSWYY-2024 石斛新品种"粉佳人"种苗组培快繁技术规程 1范围 本技术方案包括石解新品种“粉佳人”种苗繁育的组培生产流程和炼苗移栽内容.
本方案可为石解 种苗组培繁育提供参考.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.
其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6001有苗技术规程 T/SGZX007-2022铁皮石解绿色生产技术规程 T/GXAS330-2022粉梦幻石解种苗生产技术规程 DB53/T290.2-2013紫皮石解第2部分：种苗培育 DB53/T290.2-2013紫皮石解第3部分：生产技术规程 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件.
3.1快繁rapid propagation 利用组织培养技术进行种苗快速繁殖.
3.2接种inoculation 按无菌操作技术要求将目的植物材料移接到培养基质中的过程.
3.3外植体explant 用于用于组织培养启动的植物材料，包含组织、器官等.
3.4不定芽adventitious bud 凡从叶、根、茎节间等通常不形成芽的部位生出的芽.
3.5炼苗acclimatization 将试管苗连培养瓶一起移至室外近自然环境中培养，增强苗木对自然光照和温差变化适应能力的 过程.
4种苗繁育条件 4.1接种室 主要用于材料的消毒和接种、培养物的继代转移等的场所.
要求无尘、无对流空气的洁净环境.
进 入室内的工作人员应换上洁净的工作服、工作帽和拖鞋，避免带入杂菌引起空气污染.
4.2培养室 培养试管苗的场所，卫生保持清洁干净，内置多层培养架.
温度根据种苗品种、培养目的进行调控，
T/004 SMSWYY-2024 培养温度25（土2）℃：光照强度1500~2000lx，每天光照时间14h，环境湿度60%~80%.
5组培生产流程 5.1母株的确定 选择品种纯正、农艺性状优良、生长健壮、无病虫害的植株作为母株.
5.2外植体消毒 植株取回来后，剪取茎段，先用洗洁精溶液刷洗表面，用自来水冲洗干净，移至超净工作台上.
先 用75%的酒精消毒30秒，再用0.1%氯化汞溶液，添加两滴Tween-20灭菌10~15min后将材料取出，用 无菌水彻底冲洗4~5次.
5.3诱导培养 将冲洗好的外植体切成约2.0cm左右的切段，每一切段应至少保留1个节，接种到1/2MS6-BA3 mg/L香蕉泥100g/L白糖30g/LAC1g/L琼脂粉5.6g/L培养基上，pH5.6~5.8，每瓶接种1条单节茎 段.
培养养6个月后，可长到4-6cm，将新生茎段切下，放在培养基中继代培养，可获得更多组培材料.
5.4增殖培养 琼脂粉5.6g/L，pH5.6～5.8）中，每瓶接种20个，培养4-6个月，通过不定芽增殖可获得更多组培苗.
5.5生根培养 将增殖组培苗茎段接种到生根培养基（1/2MSNAA1mg/L香蕉泥100g/L白糖15g/L琼脂粉5.6 g/L，pH5.6~5.8）中，每瓶接种20个，培养4个月后，可获得生根组培苗.
6炼苗与移栽 6.1炼苗 将培养好的“粉佳人”石解苗不重叠放置在大棚内，遮光率60~80%，炼苗15天即可进入移栽阶段.
6.2洗苗 轻轻将苗顺瓶口取出，用清水清洗根部附着的培养基，再用甲基托布津1000～1500倍液浸泡 10~15min，放于阴凉、通风、透气处晾干.
6.3基质准备 基质为松树皮与杉木皮为混合物，混合比例为2:1，用1500倍液甲基托布津浇透灭菌晾干.
将预 处理好的基质装入47.5cm*47.5cm*5cm规格的培育筐中备用.
6.4移栽 移裁时间为9月，将石解苗株行距9cm*9cm移栽，光照度为30%.