ICS 07.060:13.060 Z17 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T33584.6-2017 海水冷却水质要求及分析检测方法 第6部分：异养菌的测定 Seawater quality requirements and analysis methods for seawater cooling system-Part 6:Determination of heterotrophic bacteria 2017-05-12发布 2017-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布
GB/T 33584.6-2017 前言 GB/T33584《海水冷却水质要求及分析检测方法》分为6个部分： 第1部分：钙、镁离子的测定； 一第2部分：锌的测定； 第3部分：氯化物的测定： 一第4部分：硫酸盐的测定： 第5部分：溶解固形物的测定； 第6部分：异养菌的测定.
本部分为GB/T33584的第6部分.
本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本部分由国家海洋局提出.
本部分由全国海洋标准化技术委员会（SAC/TC283）归口.
本部分起草单位：国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所、浙江国华浙能发电有限公司.
本部分主要起草人：李亚红、周筝、赵小芳、张益、元吴、张连涛、吴彭杰.
GB/T33584.6-2017 引言 在以海水为水源的海水冷却水系统中易于滋生微生物污垢沉积等危害，因此，在系统运行过程中常 需测定微生物量，用以评估系统生物污染程度，以及所采用的生物防治技术的有效性和经济性，其中最 常测定的是黏液形成菌总数.
但在黏液形成菌的测定过程中，需采用成套的黏泥采集装置，样品为生物 黏泥样，样品状态为含水固体，须经研磨后定量稀释测定，导致这种采样方式在实践中受到限制，且研 磨、稀释黏泥样品后再进行测定，也增加了测定步骤和污染机率，使得黏波形成菌的检测很难日常化.
本部分测定的异养菌是一类生活于海水冷却水中的浮游细菌，其存在和数量可以直接反映海水冷 却系统的生物污染程度.
本部分舍弃黏泥采集装置，直接采集水样测定异养菌数，简化了采样和制样步 骤，使得异养菌的测定得以日常化，提高了海水冷却水的运行管理水平.
GB/T 33584.6-2017 海水冷却水质要求及分析检测方法 第6部分：异养菌的测定 1范围 GB/T33584的本部分规定了海水冷却水质要求和采用平Ⅲ计数法测定海水冷却水中异养菌的方 法原理、试剂与材料、仪器与设备、分析测定、菌落计数、菌落总数的计算和报告方式.
本部分适用于海水冷却水中异养菌的测定，也适用于原海水中异养菌的测定， 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件.
3.1 异养菌heterotrophic bacteria 利用有机物分子作为能源的微生物.
3.2 菌落形成单位colony-formingunit:CFU 采用平Ⅲ计数法测定的菌落数量.
3.3 蔓延菌落spreadingcolony 在琼脂培养基表面呈弥漫生长的菌落.
4水质要求 海水冷却水主要水质指标应符合表1的规定， 表1海水冷却水主要水质要求 项目 单位 允许值 钙离子（Ca） mg/L <1 000 镁离子（Mg） mg/L 3 200 离子（Zn²） mg/L 氯化物（CI） mg/L ≤42 000 1 GB/T 33584.6-2017 表1（续） 项目 单位 允许值 硫酸盐（SO） mg/L 6000 溶解固形物 g/L 100 异氧菌 CFU/mL ≤5.0×10* 注1：Ca²Mg、CI、SO²、异氧菌的允许值引自GB/T23248-2009的6.1.2和6.1.3 注2：Zn”的允许值引自GB8978一1996中表4第二类污染物最高允许排放度一级标准. 注3：溶解固形物的允许值依据实际海水冷却工程最大浓缩倍数N-2.5倍确定. 5方法原理 待测水样经适当稀释后，倾注接种到的营养琼脂中，于有氧条件下，在29C士1C下培养72h后， 水样中的单个异养菌将在营养琼脂上形成肉眼可见的单菌落，统计每个平皿的菌落数，根据其对应的 稀释倍数和接种量，即可换算出待测水样中的异养菌数. 6试剂与材料 除非另有说明，在分析中化学试剂仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水. 6.1氯化钠. 6.2硫酸镁. 6.3氯化镁， 6.4氯化钙. 6.5氯化钾. 6.6碳酸氢钠. 6.7牛肉膏. 6.8蛋白陈. 6.9磷酸氢二钾. 6.10琼脂. 6.11氢氧化钠溶液：160g/L. 6.12盐酸溶液：111. 6.13硫代硫酸钠：将硫代硫酸钠置于称量纸上，转人无菌箱（室）或超净工作台（7.1）内，并均匀地摊放 在离紫外线灯的垂直距离30cm处灭菌30min备用. 6.14陈海水：取天然海水避光保存3个月以上，使用时取其清液或经0.45um滤膜过滤的滤液， CO加人到1L水中.混匀后备用. 6.16培养基：将3.0g牛肉膏、10.0g蛋白陈、0.05g磷酸氢二钾和15.0g琼脂加人到500mL陈海水 （6.14）或人工海水（6.15）和500mL蒸馏水配制的混合水中，加热溶解（如用含杂质较多的琼脂配制时， 应越热用四层医用脱脂纱布过滤），用热水补充至1000mL后，用氢氧化钠溶液（6.11）或盐酸溶液 （6.12）调节pH值至7.2士0.2，并分装于三角瓶（7.9）中，于121C士1C下蒸汽压力灭菌20min，冷却 后备用. 2
