ICS07.060:13.060.01 Z17 HY 中华人民共和国海洋行业标准 HY/T228-2018 藻类脂肪酸的测定 气相色谱法 Determination of fatty acids in algae-gas chromatography 2018-02-13发布 2018-05-01实施 国家海洋局 发布
中华人民共和国海祥 行业标准 蕴类脂肪酸的测定气相色谱法 HY/T 2282018 中国标准出版社出版发行 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 网址.spc.net.cn 总编室：（010）68533533发行中心：（010）51780238 设者服务部：（010）68523946 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 各地新华书店经销 开本880X12301/16印张0.75字数16千字 2019年1月第一版2019年1月第一次印刷 书号：1550662-33980定价16.00元 如有印装差错由本社发行中心调换 ：（010）68510107
HY/T228-2018 前言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草.
本标准由国家海洋局提出.
本标准由全国海洋标准化技术委员会（SAC/TC283）归口.
本标准起草单位：国家海洋局第一海洋研究所、中国科学院海洋研究所、中国海洋大学.
本标准主要起草人：杨佰娟、李倩、郑明刚、郑立、韩笑天、刘涛、朱明壮、陈发荣.
HY/T 228-2018 藻类脂肪酸的测定气相色谱法 1范围 本标准规定了藻类中脂肪酸的气相色谱测定方法.
本标准适用于藻类中脂肪酸的测定.
其他藻类中脂肪酸的测定可参考使用.
2规范性引用文件 下列文件对于本文 件的应用是必不可少的.
凡是注日期的引用文 仅注用 期的版本适用于本文 件.
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本文 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3方法原理 藻类样品中的脂肪酸，经氢氧花理导溶液电化和盐酸甲商器液里酷化经正已培提取后，用气相 色谱法测定！
4试剂和材料 除非另有说明本方法所试剂购寿分折纯，水为GB/T 65之规定的 级水 4.1试剂 4.1.1氢氧化钟 KON 4.1.2盐酸（HCI） 4.1.3氯化钠（NaCl 4.1.4正已烷（CH） 将纯.
4.1.5甲醇（CHOH）：色谱纯 4.1.6无水硫酸钠（NagSO）：400C构烧4h.冷却后密闭保存 效期1个月.
4.2试剂配制 4.2.1饱和氢氧化钾甲醇溶液：称取40g氢氧化钾溶解在100mL甲醇中，搅拌溶解，澄清备用，室温 下可放置2个月.
4.2.2盐酸甲醇溶液（1mol/L）：量取10mL盐酸溶解在110mL甲醇中，混匀，室温下可放置2个月.
4.2.3饱和氯化钠溶液：称取360g氯化钠溶解在1L蒸馏水中，搅拌溶解，澄清备用，室温下可放置2 个月.
4.3标准品 4.3.1十一碳酸甘油三酯，纯度大于99% 4.3.2十一碳酸甲酯标准品，纯度大于99%.
HY/T228-2018 4.3.3混合脂肪酸甲酯标准品.
4.3.4单个脂肪酸甲酯标准品（可根据需求购买），纯度大于99%.
4.4溶液的配制 4.4.1十一碳酸甘油三酯内标溶液（0.15mg/mL）：准确称取15mg十一碳酸甘油三酯（4.3.1）至 100mL容量瓶中，用甲醇定容，冰箱4C避光冷藏保存，有效期1个月.
4.4.2单个脂肪酸甲酯标准溶液（1mg/mL）：准确称取100mg脂肪酸甲酯标准物质（4.3.4）于100mL 容量瓶中，用正已烷定容，贮存于一20C冰箱，有效期3个月.
4.4.3混合脂肪酸甲酯标准溶液（10pg/mL）：取出适量脂肪酸甲酯混合标准溶液（4.3.3）移至10mL 容量瓶中，用正已烷定容，配制成脂肪酸甲酯标准物质浓度为10ug/mL溶液.贮存于一20C冰箱，有 效期3个月.
5仪器和设备 5.1气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器.
5.2电热恒温水浴锅：控温范围25C~100C，控温精度士1℃ 5.3电子天平：感量0.1mg.
5.4粉碎机.
5.5具塞离心管.
5.6容量瓶.
5.7研体 6分析步骤 6.1藻粉的制备 藻类经冷冻干燥24h.
干燥后大型藻经过粉碎机（4.4）粉碎过80目筛，微藻直接进行6.2. 6.2皂化 用天平称取藻粉约20mg，放人研体（5.7）中，准确加人0.2mL十一碳酸甘油三酯内标溶液 （4.4.1），加人液氮反复研磨2次~3次，每次5min，用6.0mL饱和氢氧化钾甲醇溶液（4.2.1）分2次~ 3次将研磨后的藻粉转移至具塞离心管（5.5）中，混匀.
将离心管放人60C水浴锅内加热处理60min， 每隔10min取出振荡5s~10s.处理结束后取出离心管冷却至室温.
6.3甲基化 皂化后的试样加人4mL1mol/L盐酸甲醇溶液（4.2.2）.混匀，将离心管放人60C水浴锅内加热 处理20min，每隔10min取出振荡5s~10s.处理结束后取出离心管冷却至室温. 6.4萃取 甲基化后的试样准确加入1mL正已烷，加人3mL饱和氯化钠溶液（4.2.3），将管盖拧紧，涡旋振 荡2min，静置3min~5min待溶液分层后，取大约0.5mL上层正已烷，用无水硫酸钠脱水后进行气相 色谱分析.
