ICS 07.060;13.060 Z 17 HY 中华人民共和国海洋行业标准 HY/T259-2018 海洋生物体中六溴环十二烷的测定 高效液相色谱-串联质谱法 Determination of hexabromocyclododecanes in marine organisms- Highperformanceliquid chromatography tandem mass spectrometry 2018-07-30发布 2018-11-01实施 中华人民共和国自然资源部 发布
HY/T259-2018 目次 前言 1范围. 2规范性引用文件 3方法原理 4试剂或材料 5仪器设备 .... 6样品 7试验步骤 8试验数据处理 9精密度 5 10灵敏度. 附录A（资料性附录）六溴环十二烷标准溶液色谱图和质谱图 附录B（资料性附录）海洋生物体中六溴环十二烷分析记录表
HY/T259-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草.
本标准由中华人民共和国自然资源部提出.
本标准由全国海洋标准化技术委员会海洋环境保护分技术委员会（SAC/TC283/SC1)归口.
本标准主要起草单位：浙江省海洋水产研究所、浙江省海洋监测预报中心.
本标准主要起草人：张小军、严忠雍、陈雪昌、方益、张帅、孙秀梅、郭远明、陈思、梅光明、李佩佩、 李铁军、宋.
HY/T 259-2018 海洋生物体中六溴环十二烷的测定 高效液相色谱-串联质谱法 1范围 理、样品贮存、操作步骤及结果计算等方法.
本标准适用于海洋生物体中α-HBCD、β-HBCD和y-HBCD的测定.
2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的.
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件.
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单)适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB17378.2海洋监测规范第2部分：数据处理与分析质量控制 GB17378.3一2007海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输 3方法原理 海洋生物体中的六溴环十二烷经正已烷提取后，旋蒸浓缩经硅胶固相萃取柱净化，氮气吹干用甲醇 定容，通过高效液相色谱柱分离，以甲醇、乙睛和水为流动相进行洗脱，用高效液相色谱-串联质谱法测 定a-HBCD、β-HBCD和y-HBCD的含量，内标法定量.
4试剂或材料 4.1除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，水符合GB/T6682一级水要求.
4.2正已烷（CgH）：色谱纯.
4.3甲醇(CHOH)：色谱纯.
4.4乙晴(CH CN)：色谱纯.
4.5二氯甲烷（CHCl）：色谱纯.
4.6六溴环十二烷（HBCD)单标储备液：标准物质，α-HBCD、β-HBCD、y-HBCD质量浓度均为 100 μg/mL.
4.7六溴环十二烷同位素（C-HBCD)单标储备液：标准物质，”C-α-HBCD、"C-β-HBCD、"C-- HBCD质量浓度均为50.0μg/mL.
4.8六溴环十二烷混合标准中间液：分别准确移取0.50mLα-HBCD、β-HBCD、y-HBCD标准溶液 (4.6)，用甲醇稀释至50.00mL，配成α-HBCD、β-HBCD、y-HBCD质量浓度均为1.00μg/mL的混合溶 液，4C冷藏保存，有效期6个月.
4.9六溴环十二烷混合标准使用液：准确移取1.00mL六溴环十二烷混合标准中间液（4.8)，用甲醇稀 1
HY/T259-2018 期1个月.
4.10六溴环十二烷混合内标中间液：分别准确移取1.00mL"C-α-HBCD、"C-β-HBCD、"C-y-HBCD 1.00μg/mL的混合内标溶液，4C冷藏保存，有效期6个月.
4.11六溴环十二烷混合内标使用液：准确移取1.00mL六溴环十二烷混合内标中间液（4.10)，用甲醇 稀释至10.00mL，C-α-HBCD、"C-β-HBCD、"C-r-HBCD质量浓度均为100ng/mL的混合内标溶液， 4C冷藏保存，有效期1个月.
5仪器设备 5.1高效液相色谱-串联四级杆质谱仪：配备电喷雾(ESI)离子源.
5.2色谱柱："C柱100mm×2.1mm，1.7um，或者其他性能相当的色谱柱.
5.3硅胶固相萃取柱：6mL，含1000mg硅胶.
5.4超声波清洗机.
5.5旋转蒸发仪.
5.6高速离心机：转速不少于4000r/min.
5.7分析天平：感量0.01g.
5.8有机相微孔滤膜：孔径0.22μm.
5.9固相萃取装置.
5.10氮气吹干仪.
5.11涡旋混合器：转速不少于1500r/min.
5.12均质器.
6样品 海洋生物体样品的采集、预处理、制备和保存，按GB17378.3一2007中第6章的有关规定执行.
7试验步骤 7.1提取 称取5.00g（准确到0.01g)均质后的待测样品，置于50mL离心管中，加人100μL内标标准使用 液（4.11)，再加人15mL正已烷(4.2)，涡旋振荡1min，超声振荡10min后，6000r/min离心5min，将 上清液转移至旋转蒸发瓶；残渣用15mL正已烷（4.2)按上述方法再提取一次，所得上清液合并至旋转 蒸发瓶，在40C水浴条件下旋转蒸发浓缩至近干，加人5mL正已烷（4.2）溶解，超声振荡1min备用.
7.2净化 移取提取液加至已用5mL正已烷(4.2)活化后的硅胶柱固相萃取柱上，先用2mL正已烷(4.2)淋 洗，再用5mL二氯甲烷（4.5）洗脱，洗脱流速为1.0mL/min，用15mL离心管收集洗脱液，洗脱液于 40C氮气吹干，加1.00mL甲醇（4.3)，旋涡振荡1min，经0.22μm有机相微孔滤膜过滤后分析.
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