ICS 65.150 B51 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC 2081-2007 菲律宾蛤仔 Manila clam 2007-12-18发布 2008-03-01实施 中华人民共和国农业部发布
SC2081-2007 前言 本标准的第3章和第5章为强制性的，其余为推荐性的.
本标准的附录A为规范性附录.
本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出.
本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口.
本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所.
本标准主要起草人：刘萍、孔杰、孙慧玲、燕敬平、于东祥、王清印.
SC 2081-2007 菲律宾蛤仔 1范围 本标准给出了菲律宾始仔（Ruditapesphilippinarum）的主要形态结构特征、生长与繁殖、细胞遗 传学和生化遗传学特性以及检测方法.
本标准适用于菲律宾蛤仔种质的检测和鉴定.
2名称与分类 2.1学名 菲律宾蛤仔Ruditapes philippinarum（Adams etReeve，1850）.
2.2分类位置 双壳纲（Bivalvia）、异齿亚纲（Heterodonta）、帘蛤目（Veneroida）、帘蛤科（Veneridae）、蛤仔属（Ru- ditapes). 3形态特征 3.1外部形态特征 菲律宾始仔的贝壳呈卵圆形，两壳大小相等，壳顶稍突出，前端尖细，略向前弯曲，位于背缘靠前 方，小月面宽，椭圆形或略显梭形；桥面梭形，韧带长，突出.
贝壳前端边缘椭圆，后缘略呈截形，壳面 灰黄色或灰白色，花纹变异特多，壳面放射肋较细密，与同心生长纹交织形成的布目格通常呈长方形.
壳内面灰白色或淡黄色，饺合部白色，前闭壳肌痕半圆形，后闭壳肌痕圆形，外套痕明显，外套窦深，前端 圆形.
1 cm 图1菲律宾始仔外形 3.2内部结构特征 外套膜除背面外，在后端和腹面愈合形成出人水管，水管壁厚，大部分愈合，仅在末端分离，关口周 围具不分枝的触手，伸展状态下的水管约为体长的1.5倍.
3.3可数性状 菲律宾蛤仔两壳的铰合部各具主齿3枚.
放射肋90条～100条左右.
3.4可量性状 由壳顶到贝壳前端的距离约等于贝壳全长的1/3.
SC 2081-2007 4生长与繁殖 4.1生长 4.1.1年龄与生长 不同年龄组个体的壳长、体重见表1.
表1不同年龄组个体的壳长、体重（带壳鲜重）实测值 年龄 壳长范围 平均壳长 体重范围 平均体重 龄 mm mm g g 1 20.7~25.2 21.6 1. 16~3.8 2.6 2 28.0~36.8 33.7 4.54~10.0 7.5 3 39.0~44.8 43. 8 9. 61~18. 2 14.7 48.7~53.2 49.6 20. 2~23.75 21.3 4.1.2体长与体重的关系式 壳长与体重的关系见式（1).
W=0.000 2 L.0 (1) 式中： W-体重，单位为克（g）； L-壳长，单位为毫米（mm）.
4.2繁殖特性 4.2.1性成熟年龄 菲律宾始仔为雌、雄异体，性成熟最小年龄雄性和雌性均为1龄.
4.2.2产卵特性 性成熟个体在一个繁殖季节可多次产卵.
繁殖水温为17℃～23℃.
4.2.3产卵量 万～200万粒.
5细胞遗传学特性 5.1染色体组型 2n=38，核型为18m20sm，NF=76；染色体核型见图2.
xx 8 10 38 11 xx 8元 12 A 13 14 15 16 17 18 19 5μm 图2 菲律宾蛤仔染色体组型图 2
SC 2081-2007 6生化遗传学特征 6.1同工酶的谱型 肌肉中谷氨酸脱氢酶（GDH）电泳图谱见图3.
图3谷氨酸脱氢酶（GDH）电泳图谱 6.2群体变异范围 在8种同工酶中共检测到19个位点，多态位点比例为Pa=36.8%：平均杂合度H.
=0.050 ±0. 023. 7检测方法 7.1染色体检测 7.1.1标本的制备 取蛤幼体（壳长大约为1cm~2cm），用含0.005%秋水仙素的海水中浸泡12h，然后，解剖取鳃， 用0.09%的生理盐水处理30min或稀释的海水低渗处理45min.
使用新配置的甲醇一冰醋酸（3：1） 溶液固定样品3次（每次20min）.
为了提高染色体的长度，在有些情况下，在秋水仙素处理和解剖以 前，用含50μg/mL5-溴脱氧尿苷的海水中培育5d.用空气干燥法制片，用Giemsa（4%，pH6.8） 染色.
7.1.2染色体计数 观察100个以上中期分裂相，并记数以确定二倍体染色体数.
7.1.3核型分析 从中选取10个分散良好、形态清晰的中期分裂相，进行显微摄影，并放大测量.
按以下规定对染色 体分类：臂比1.00~1.70，为中部着丝粒染色体m组：1.71~3.00，为亚中部着丝粒染色体sm组； 3.01~7.00，为亚端部着丝粒染色体st组：7.01~00，为端部着丝粒染色体t组.
统计处理测量数据，分 析染色体特征，得出核型公式.
7.2生化遗传分析 7.2.1样品制备 取菲律宾蛤仔活体解剖，取适量腹足肌肉组织，编号，迅速放入一70℃保存.
取适量肌肉，分别加人 约3倍体积W/V的0.05%硫基乙醇组织提取缓冲液，在冰浴条件下匀浆，4C离心机中12000r/min离 心30min，取上清液，按需要量分装人小管中置于一70C备用.
7.2.2电泳分析 同工酶电泳采用不连续聚丙烯酰胺凝胶毒直电泳，电泳在4C冰箱中进行.
对凝胶浓度、电压、电 极缓冲液、点样量的多少和染色条件进行摸索和优化，电泳参数如下： 凝胶浓度（T）：Tmm=3.6%（pH6.7），T=8.2%（pH8.9）.
电压：Tris-柠檬酸（TC，pH7.0）系统，恒压230V，电泳时间6h~8h.
点样量视不同种酶类面异.
染色液配方如附录A所示.
染色方法：黑暗条件下，放人37C恒温培养箱中保温60min，酶带染成蓝色.
7.2.3结果计算 多态位点比例按式（2）计算：
