ICS 65.150 B 50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 1087.1-2006 渔药毒性试验方法 第1部分:外用渔药急性毒性试验 Methodof toxicity testoffisherydrugs Part 1:Acute toxicity test of external fishery drugs 2006-12-06发布 2007-02-01实施 中华人民共和国农业部发布
SC/T 1087.1-2006 前言 SC/T1087《渔药毒性试验方法》分为二个部分: 第1部分:外用渔药急性毒性试验; 第2部分:外用渔药慢性毒性试验.
本部分为SC/T1087的第1部分.
本部分的附录A、B为规范性附录,附录C、D为资料性附录.
本部分由中华人民共和国农业部提出.
本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口.
本部分起草单位:上海水产大学、农业部渔业动植物病原库.
本部分主要起草人:杨先乐、杨勇.
SC/T 1087.1-2006 渔药毒性试验方法 第1部分:外用渔药急性毒性试验 1范围 本部分规定了外用渔药对试验水生动物急性毒性试验的方法.
本部分适用于外用渔药急性毒性试验.
2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款.
凡是注日期的引用文件,其随后 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分,然面,鼓励根据本部分达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本部分.
GB/T13267-1991水质物质对淡水鱼(班马鱼)急性毒性测定方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准.
3.1 渔药fishery drugs 本标准所指的渔药是指用以预防、控制和治疗水产动植物的病、虫、害,促进养殖品种健康生长,增 强机体抗病能力以及改善养殖水体质量的一切物质.
3.2 急性毒性试验acute toxicity test 高浓度或较高浓度的被测试渔药,引起试验水生动物群体在短时间内产生一定有害作用的试验.
3.3 静水式试验static test 试验期间不需更换试验液,限于研究那些化学性质比较稳定的渔药.
3.4 换水式试验semistatic test 每24h或更短的时间更新一次试验液.
3.5 半数致死浓度medianlethalconcentration 在确定的试验条件和规定的时间内(如24h、48h或96h),试验水生动物在待测试渔药的作用下, 导致其半数死亡的该渔药的浓度.
这个浓度常以某个时间(如24h、48h或96h)的LCs(半数致死浓 度)表示.
4试验 4.1试验水生动物 选用剑尾鱼(Xiphophorushelleri)为试验水生动物,并不排除使用其他试验水生动物[如斑马鱼 (Brachydaniorerio)或其他海水养殖的水生动物等],但试验条件需做相应的改变(如盐度、pH等).
试 1
SC/T 1087.1-2006 验水生动物应选自同一驯养池中规格大小一致的健康个体.
试验前试验对象要在与试验时相同的环境条件下至少养2周,期间死亡率不得超过10%,否则 该批试验动物不得用作试验.
别养期间不得用任何药物.
试验前24h停止投饲,每天清除粪便及食物残渣.
剑尾鱼和斑马鱼驯养与繁殖的环境参数参见附录C、D.
4.2标准稀释水、渔药储备液和试验溶液 4.2.1标准稀释水 4.1.2.1标准稀释水的制备 用蒸馏水分别制备92mmol/L浓度的氯化钙、27mmol/L浓度的硫酸镁、35mmol/L浓度的碳酸氢 钠和3mmol/L浓度的氯化钾等四种溶液(附录B),然后取以上4种溶液各25mL混合并稀释至1L,充 分曝气至溶解氧浓度达到空气饱和值,即为标准稀释水.
它用于配制渔药储备液和试验溶液.
4.1.2.2标准稀释水水质基本要求 新配置的标准稀释水pH应为7.8±0.2,硬度为250mg/L左右(以CaCO计).
在酸碱度达不到 所规定要求时,可用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH.
4.2.2渔药储备液 将已知量的渔药(以有效成分计)溶于一定体积的标准稀释水中,即为渔药储备液.
该储备液作为 配制试验溶液的母液供当天使用.
对于化学性质较稳定的渔药,配制的储备液在4℃保存可供2d使 用.
对溶解度低的渔药,在溶解时可使用超声波装置促使溶解,或加人对试验没有影响的有机溶剂,但 有机溶剂在试验溶液中的浓度不应超过0.1mg/L.
4.2.3试验溶液 将适量的渔药储备液加人标准稀释水中,使其达到所需要的浓度,即为试验溶液.
4.3仪器设备 4.3.1试验容器 试验容器应为玻璃或其他化学情性物质制成的无明显吸附试验渔药的容器,并保证有足够大的容 积,试验介质与空气间有足够大的界面(每10L水要有大约800c²的界面积),并备有牢固的密封盖.
初次使用的试验容器应仔细清洗.
试验后,倒空容器,清洗掉残留渔药,干燥后备用.
4.3.2控温设备 控温装置应满足将试验溶液和试验容器中的水温调节至试验设定温度.
4.3.3抄网 抄网用尼龙纱绢或纱布制成,做到专网专用.
4.4环境条件 试验液中溶解氧浓度不低于5mg/L;每天光照保持12h~16h;避免强光直射;试验期间水温恒定 于设定的温度;试验过程中尽量避免外界干扰.
试验溶液的配制与储存、试验水生动物的管理及全部试 验都应在空气污染物未达到有害浓度的环境下进行.
选择重铬酸钾(KCrO)作为参考毒物、24h重铬酸钾的LCs值应处于200mg/L~400mg/L.
可 根据需要进行多次参考毒物的毒性试验,以得到参考毒物试验数据重现性的资料,每当蓄养种群发生变 化都应按本方法规定的条件重复进行试验.
4.5试验步骤 4.5.1预备试验 预备试验用于确定试验浓度的范围.
预备试验浓度梯度一般以10为公比作间隔.
在6个容器中加人适量标准稀释水,其中5个容器中随机加人适量的渔药储备液,配制一组适宜的 浓度系列,第6个容器用作对照,每个容器放试验水生动物5尾(只).
如果数据不充分,无法确定正式 2
SC/T 1087.1-2006 试验所需要的浓度范围,则另选一组浓度范围重新进行试验.
在试验所要求的温度下进行试验,试验时间为24h~26h.
每天定时测定2次容器中的溶解氧浓 度,发现试验水生动物死亡及时处理.
4.5.2正式试验 4.5.2.1确定试验方式 根据被测试渔药的性质确定采用静水式或换水式试验.
4.5.2.2试验浓度和试验分组 试验浓度确定在试验水生动物全部死亡的最低浓度与全部不死亡的最高浓度间,按预备试验确定 的浓度范围以几何级数做间距,选择6个浓度进行正式试验,并设平行,其中包括一个不含试验渔药的 试验溶液的对照(如果用有机溶剂溶解试验渔药,则需要加设一个含有有机溶剂的对照,其有机溶剂的 浓度与试验溶液中有机溶剂的最高浓度相同).
所选择的试验溶液的浓度应包括能够测得试验水生动 物20%到80%死亡率的浓度.
4.5.2.3试验操作 从别养试验水生动物群体中随机、迅速取10尾(只)或10尾(只)以上的试验水生动物放入各试验 容器中.
在操作过程中因转移处理错误的试验水生动物弃去不用.
全部操作过程要在30min内结束.
换水式试验每8h-24h更换一次试验液.
试验水生动物转移时应从最低浓度到高浓度,避免造成 试验渔药的明显转移.
4.5.2.4试验观察和记录 观察并记录试验水生动物的平衡、游动、呼吸、体色变化等中毒症状和死亡情况,特别是试验开始后 3h~6h内.
以后每天至少记录2次并及时清出死亡动物.
每天定时测定2次试验液的溶解氧、pH和 温度,试验开始和结束时还应测定各组试验液中渔药的浓度,记录表格见附录A.
5结果的表述 5.1死亡率的修正 试验要求对照组的死亡率不得超过10%(最好低于5%),否则试验要重新进行.
当对照组中试验 水生动物出现偶尔死亡时,各浓度组的死亡率按(1)式加以修正.
P= P-C 1-C 式中: P-校正后的死亡百分数,%; P一-试验组死亡百分数,%; C一对照组死亡百分数,%.
5.2LC计算 常以48hLC或96hLCs表示.
5.3试验报告 试验报告中要求包括下列资料及数据: a)试验方式、试验水温及试验水质基本情况.
b)试验水生动物的详细情况.
c)配制稀释水、储备液和试验液的方法.
d)试验水生动物的中毒症状,试验和对照组中试验水生动物的死亡率及其反应异常率.
e)LCs计算方法以及24h、48h、72h和96h的LCs值(在可能情况下列出其95%置信限).
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