ICS 67.120. 30 X20 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 3015-2002 水产品中土霉素、四环素、金霉素 残留量的测定 Determination ofoxytetracycline tetracycline andchlortetracyclineresidues infish 2002-11-05发布 2002-12-20实施 中华人民共和国农业部发布
SC/T3015-2002 前言 本标准由农业部渔业局提出.
本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口.
本标准起草单位：国家水产品质量监督检验中心. 本标准主要起草人：李兆新、李晓川、王联珠、陈远惠、翟毓秀.
SC/T 3015-2002 水产品中土霉素、四环素、金霉素 残留量的测定 1范围 本标准规定了水产品中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定方法，规定了最低检出浓度.
本标准适用于水产品可食部分中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定.
2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是 否可使用这些文件的最新版本.
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 样品经高氯酸提取，固相萃取，纯化、浓缩，微孔滤膜过滤后，直接进样，用反相色谱分离，紫外检测 器检测，外标法定量.
出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素.
4试剂 4.1乙睛：色谱级.
4.20.01mol/L磷酸二氢钠溶液：称取1.56g（称准至0.01g）分析纯磷酸二氢钠（NaH PO.2HO） 4.3土霉素、四环素、金霉素混合标准溶液：称取土霉素0.01g（称准至0.0001g）、四环素0.01g（称 准至0.0001g），金霉素0.02g（称准至0.0001g），溶于0.01mol/L磷酸二氢钠溶液中，定容至 100.0mL，此溶液每毫升含土霉素100pg、四环素100μg、金霉素200μg.
以上标准品均按1000IU/mg计算，本溶液于0C~4C时保存，可使用一周.
100.0mL，得土霉素、四环素浓度为10μg/mL，金霉素浓度为20μg/mL的混合标准溶液.
以上述混合标准溶液配制土霉素、四环素标准使用浓度系列：0.05、0.10、0.20、0.25、0.50、1.0pg/ mL；以上述混合标准溶液配制金霉素标准使用浓度系列：0.10、0.20、0.40、0.50、1.0、2.0pg/mL.
此标 准使用液使用时现配.
4.50.5%或1%高氯酸溶液.
4.6甲醇：分析纯.
4.75%乙二胺四乙酸二钠溶液：取5g分析纯乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）溶解定容至100mL.
4.8水：实验用水应符合GB/T6682中一级水标准 4.9正已烷：分析纯.
务平 4.10氮气：纯度大于99%.
5仪器 5.1高效液相色谱仪：具紫外检测器.
SC/T 3015-2002 5.2分析天平：感量为0.0001g.
5.3均质器.
5.4预处理柱：ODS-C 5.5离心机：4000r/min.
5.6负压抽滤器.
6色谱条件 6.1色谱柱：ODS-C 6.2检测器：紫外检测器，检测波长为355nm.
6.3灵敏度：0.002AUFS. 6.4柱温：37C.
6.5流速：1.0mL/min. 6.6进样量：30gL.
6.7流动相：乙晴和0.01mol/L磷酸二氢钠溶液的体积比为26：74.
7操作方法 7.1工作曲线 在上述工作条件下，分别取标准使用溶液各30uL进样，以峰面积为纵坐标，以标准样品含量为横 坐标，绘制工作曲线.
7.2样品测定 7.2.1样品处理 0.5cm×0.5cm×0.5cm的小块后混匀.
7.2.2样品提取 称取5.000g±0.001g样品，置于50mL离心管中，加人0.5%高氯酸溶液10mL（水溶性蛋白含 量高的样品，用1%高氯酸溶液），用均质器均质30s，于振荡器上振荡提取3min，以4000r/min离心 10min，取上清液于50mL试管中，向离心管中的残渣再加人0.5%高氯酸溶液5mL，重复操作一次， 合并上清液.
加人1mL正已烷，振荡1min后，离心，除去正已烷相；再加人1mL正已烷，振荡1min 后，离心，除去正已烷相.
水相用ODS-C柱（预先用5mL甲醇、2mL5%乙二胺四乙酸二钠溶液、5mL 实验用水洗过）预处理，用10mL蒸馏水洗去杂质，以5mL甲醇洗脱，收集洗脱液，40C水浴中氮气吹 干，以甲醇定容至1.0mL，以0.45μm滤膜过滤.
滤液备用.
7.2.3样品测定 取样品滤液30pL进样，记录峰面积，从工作曲线查得样品滤液中土霉素、四环素、金霉素的含量.
7.3计算 样品中土霉素、四环素、金霉素的含量按式（1）计算.
X=cxV/m 式中： X一样品中抗生素含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c样品溶液中抗生素含量，单位为微克每毫升（μg/mL）； m-样品质量，单位为克（g）； V-样品溶液体积，单位为毫升（mL）.
Z
SC/T3015-2002 8方法回收率 本方法的回收率≥70%.
9方法检测限 本方法检测限：土霉素≤0.05mg/kg，四环素≤0.05mg/kg，金霉素≤0.1mg/kg.
10方法批间变异系数 本方法批间变异系数≤15%.
