ICS 67.050 B 50 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 3031-2006 水产品中挥发酚残留量的测定 分光光度法 Determination ofvolatile phenolic poundsresidues infishery products Spectrophotometricmethod 2006-12-06发布 2007-02-01实施 中华人民共和国农业部发布
SC/T3031-2006 前言 本标准的附录A为资料性附录.
本标准由中华人民共和国农业部提出.
本标准的技术归口单位：全国水产品标准化技术委员会水产品加工分技术委员会.
本标准起草单位：农业部渔业环境及水产品质量监督检验测试中心（哈尔滨）.
本标准主要起草人：战培荣、王海涛、陈中祥、王崇、卢玲、赵彩霞、刘伟、薛玲玲.
SC/T3031-2006 水产品中挥发酚残留量的测定分光光度法 1范围 本标准规定了水产品中挥发酚残留量的分光光度测定方法.
本标准适用于水产品中可食部分挥发酚残留量的测定.
2规范性引用文件 本标准引用了下列文件中的条款作为本标准的条款.
凡是注日期的引用文件，其随后的修改 单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然面，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可 使用这些文件的最新版本.
凡不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法.
3原理 下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，用氯仿萃取，在460nm波长测定吸光度定量.
4试剂 本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯.
水为无酚水.
4.1无酚水的制备 4.1.1用符合GB/T6682的实验用水，每升水中加人0.2g经200C烘干30min的活性炭粉末（粒径 0.1mm~0.5mm），充分振摇后，放置过夜，用双层中速滤纸过滤.
4.1.2加氢氧化钠（NaOH）使水呈强碱性，并滴加高锰酸钾溶液至紫红色，移人全玻璃蒸馏器中加热 蒸馏，取馏出液备用.
4.2氯仿（CHCl）.
4.3氨水（NHHO）.
4.450%硫酸溶液：浓硫酸在搅拌下缓缓加人等体积的实验用水中.
4.510%氢氧化钠（NaOH）溶液：称取10g氢氧化钠溶于水中，稀释至100mL.
4.68%铁氰化钾溶液：称取8g铁氰化钾（K[Fe（CN）.
]）溶于水中，稀释至100mL，4C冷藏，可使用 一周.
4.710%硫酸铜溶液：称取10g硫酸铜（CuSO5HO）溶于水中，稀释至100mL.
4.80.05%甲基橙指示液：称取甲基橙0.05g溶于水中，稀释至100mL.
4.9缓冲溶液：称取20g氯化铵（NHCI）溶于100mL氨水（NHyHO）中，pH约10.7 4C冷藏.
4.102%4-氨基安替比林溶液：称取2g4-氨基安替比林（CHsNO）溶于水中，稀释至100mL，4C冷 藏，可使用一周.
4.11标准贮备溶液：从国家标准物质机构购置标准溶液.
4.12标准使用液：取适量苯酚标准溶液，用无酚水稀释至每毫升含1.00pg酚，配制后要在两小时内 使用.
5仪器 实验室常规仪器及下列各项.
SC/T 3031-2006 5.1500mL玻璃水蒸气蒸馏装置（见附录A）.
5.2500mL（梨形）刻度分液漏斗.
5.3分光光度计.
5.4组织捣碎机.
5.5电子天平.
5.6调温电炉或调温电加热套.
6测定步骤 6.1样品预处理 取水产品可食部分，用组织捣碎机搞碎，贮存备用.
6.2蒸馏提取 液（4.5）75mL，搅拌10min.
再加3~5滴甲基橙（4.8）指示剂，用50%硫酸（4.4）调节pH≤4（溶液星 杯，洗涤液并人蒸馏瓶中并加数粒玻璃珠.
煮沸的同时，样品蒸馏瓶也应以略低于水蒸气发生器的温度加热，防止通人的蒸气冷凝而集水.
中速蒸 60min~90min，至馏出液约240mL时，停止蒸馏，蒸馏完成后应打开水蒸气发生瓶上的阀门，使瓶 内外压力平衡.
并用10mL无酚水（4.1）冲洗冷凝管，洗涤液并入馏出液中（蒸馏过程中保持酸性）.
蒸馏液应尽量避免与橡胶制品接触（橡皮塞、橡胶管和乳胶管里含有酚类化合物添加剂），如需使用 时用硅胶管（塞）代替.
6.3显色 将馏出液移人分液漏斗中，加2.0mL缓冲溶液（4.9），混匀.
加1.5mL4-氨基安替比林溶液 (4.10)，混匀，再加1.5mL铁氰化钾溶液（4.6），充分混匀后，放置10min.
6.4萃取 准确加人10.0mL氯仿（4.2），密塞，剧烈振播2min，静置分层，彻底澄清透明后（不能存有气泡）， 用干脱脂棉拭干分液漏斗颈管内壁，于颈管内塞人一小团干脱脂棉，将氯仿通过干脱脂棉团，弃去最初 滤出的数滴萃取液，直接放人光程为1cm的比色皿中.
安替比林染料用氯仿萃取后，需6h以内测定.
6.5测定 于460nm波长下，以空白氯仿萃取液为参比，用分光光度计测量吸光度.
6.6标准曲线绘制 mL、10.0mL、15.0ml酚标准溶液（4.12），再分别加水（4.1）至250mL，显色（6.3）、萃取（6.4）后，测定 吸光度（6.5）绘制标准曲线.
6.7计算公式 样品中挥发酚类含量由（1）计算： x=c m (1) 式中： X一挥发酚含量（以苯酚计），单位为毫克每千克（mg/kg）； （一曲线查得的苯酚量，单位为微克（μg)； co---空白的苯酚量，单位为微克（μg)； 2
SC/T3031-2006 m一样品重量，单位为克（g）.
7方法回收率 标准添加浓度为0.05mg/kg~4mg/kg时，回收率80%~110%.
8方法检出限 本方法检出限：0.05mg/kg.
9重复性 两次平行测定结果相对偏差<10%. 10线性范围 氯仿萃取溶液挥发酚浓度0.002mg/L~6mg/Lo
