SC/T 7201.1-2006 鱼类细菌病检疫技术规程 第1部分：通用技术.pdf

ICS 65.020.30 B 41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 7201.1-2006 鱼类细菌病检疫技术规程 第1部分：通用技术 Rules for quarantining bacterial diseases of fish Part1:General technique 2006-12-06发布 2007-02-01实施 中华人民共和国农业部发布
SC/T7201.1-2006 前言 SC/T7201《鱼类细菌病检疫技术规程》分为五个部分： 第1部分：通用技术； 一第2部分：柱状嗜纤维菌烂鳃病诊断方法； 第3部分：嗜水气单胞菌及豚鼠气单胞菌肠炎病诊断方法； 一第4部分：荧光假单胞菌赤皮病诊断方法； 第5部分：白皮假单胞菌白皮病诊断方法.

本部分为SC/T7201的第1部分.

本部分的附录A和附录B为规范性附录.

本部分由中华人民共和国农业部渔业局提出.

本部分由全国水产标准化技术委员会归口.

本部分起草单位：中国水产科学研究院长江水产研究所、中国水产科学研究院珠江水产研究所.

本部分主要起草人：何力、邹为民、徐忠法、姜兰、周瑞琼、罗晓松.

SC/T7201.1-2006 鱼类细菌病检疫技术规程 第1部分：通用技术 1范围 本部分规定了鱼类细菌病检疫的常用试剂、培养基、器械设备、检验的常用方法以及结果的判定.

本部分适用于鱼类细菌病的检疫.

2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本部分的引用而成为本部分的条款.

凡是注日期的引用文件，其随后 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本.

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分.

GB/T4789.28一1994食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 GB/T18652一2002致病性嗜水气单胞菌检验方法 SC/T7014-2006水生动物检疫实验技术规范 3常用试剂和培养基 3.1常用试剂 除非另有说明，在检验中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水.

3.1.1醋酸铅（或三氯化铁）：用于硫化氢试验.

3.1.2柠檬酸铵铁：用于七叶苷（esculin）水解试验.

3.1.3酪氨酸：用于酪氨酸水解试验.

3.1.4二氯化汞：用于明胶液化试验.

3.1.5几丁质：用于几丁质分解试验.

3.1.6七叶苷：用于七叶苷水解试验.

3.1.7可溶性淀粉：用于淀粉水解试验.

3.1.8脱脂奶粉：用于酪素水解试验.

3.1.9过氧化氢：用于过氧化氢酶试验.

3.1.10碘液：用于淀粉水解试验.

3.1.11明胶：用于明胶液化试验.

3.1.12葡萄糖：用于葡萄糖利用试验.

3.1.13乙醚：用于靛基质试验.

3.1.14溴磨香草酚蓝：用于葡萄糖利用试验.

3.1.15V.P.试剂.

3.1.16吲哚试剂.

3.1.17格里斯氏（Griess）试剂：用于硝酸盐还原试验.

3.1.18革兰氏染色液.

3.1.19Kovacs试剂：用于靛基质试验.

5
SC/T 7201.1-2006 3.1.20鞭毛染色剂.

3.1.21微量或常量糖发酵试剂管（葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、七叶苷、水杨苷）.

常用试剂与染色液的配制见附录A.

细菌生化鉴定管可代替相应的生化试验培养基和试剂.

3.2培养基 3.2.1普通营养琼脂培养基 按GB/T4789.28-1994中的4.7执行.

3.2.2Rimler-Shotts培养基 按GB/T18652-2002附录A中的A.3执行.

3.2.3胰陈琼脂（CytophagaAgar）培养基 见附录B中的B.1.

3.2.4鉴别用培养基 见附录B中的B.2~B.12.

4器械设备 4.1常用仪器 4.1.1超净工作台.

4.1.2显微镜（10倍×100倍）.

4.1.3双筒解剖镜.

4.1.4离心机（RCF10000×g~30000×g）.

4.1.5恒温培养箱.

4.1.6高压灭菌锅.

4.1.7冰箱.

4.1.8普通天平（相对精度1/1000，分度值0.1g~0.01g）.

4.1.9生化培养箱.

4.1.10电位pH计.

4.1.11烘箱.

4.1.12恒温水浴锅.

4.1.13匀质器或乳体.

4.1.14全自动细菌鉴定仪.

4.1.15细菌生化鉴定管.

4.2常用用具 4.2.1骨剪.

4.2.2直头解剖剪刀.

4.2.3眼科手术小剪刀.

4.2.4（直头、弯头）小镊子.

4.2.5直头粗镊子.

4.2.6解剖刀.

4.2.7接种针（环）.

4.3常用器m 4.3.1白糖瓷解剖盘（桶、脸盆）.

6
SC/T 7201.1-2006 4.3.2培养皿.

4.3.3试管.

4.3.4酒精灯.

4.3.5三角烧瓶：500mL、250mlL 4.3.6载（盖）玻片.

4.3.7广口瓶：500ml.

4.3.8玻璃量筒 4.3.9铅皮标本箱.

5采样方法 按SC/T7014-2006第4章的规定执行.

6临床诊断 6.1活动情况 观察病鱼鱼体的摄食情况、行为特点等.

6.2外部检查 观察病鱼鱼体的体色.

将病鱼放在白色的搪瓷盘中，记录下病鱼的种类、年龄、全长、体长、体高和 体重.

检查鱼体体表的各部位（包括眼睛、鼻孔、吻、鳍条、口腔、鳃丝等），观察其充血、溃烂、发炎、黏液 情况；皮肤粗糙、溃烂情况；鳞片、鳍条、腹部肿大、肛门肿胀情况；病鱼是否畸形等.

6.3制片镜检 用弯头镊子（或解剖刀）刮取病变或异常部位黏液（或取其一部分组织）放在预先已滴有洁净水滴的 载玻片上，盖上盖玻片，镜检.

6.4解剖检查 将鱼的体壁剪去一面，观察是否有腹水；消化道内食物情况，肠内壁黏液、充血、发炎情况；按病症分 别检查肝、脾、肾、心等器官.

7实验室诊断 7.1取样 将检验个体以活体或用无菌操作采下病变组织，迅速放入密闭的无菌容器，低温运送到实验室.

体 表病灶明显的个体，用刀片刮去表面腐烂部分后，用接种环（针）在病灶处无菌取材进行病原菌分离；无 明显体表病灶的个体，应无菌取心血、肝、脾、肾等器官，无菌条件下操作，将样品捣碎，加无菌生理盐水 或无菌水，匀浆后进行病原菌分离.

7.2病原体分离与鉴定 7.2.1培养基 除特殊要求外，一般选用普通营养琼脂培养基.

7.2.2分离方法 按7.1的规定用无菌接种环在病灶处取样，在培养基平板上划线.

可采用各种不同的常规划线方 法，需尽量使其产生单个分散的菌落.

在28℃～30℃培养24h.

7.2.3纯培养 用无菌接种环挑取单个菌落，接种到普通营养琼脂培养基斜面试管上，在28C~30C培养24h.

7.3鉴定方法

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