ICS27.010 CCSF13 NB 备案号：XXX-XXX 中华人民共和国能源行业标准 NB/T34057.7-2020 木质纤维素类生物质原料 化学成分的测定 第7部分：淀粉的测定 Determinationofchemical ponentsin lignocellulosic feedstocks- 你准信息服务平台 Part7:Determinationofstarch 2020-10-23发布 2021-02-01实施 国家能源局发布
NB/T34057.7-2020 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
本文件是NB/T34057《木质纤维素类生物质原料化学成分的测定》的第7部分.
NB/T34057分为9 个部分： 第1部分：标准样品的制备； 第2部分：标准样品的纯化； 第3部分：水分的测定； 第4部分：可溶性糖的测定； 第5部分：纤维素、半纤维素、果胶和木质素的测定； 第6部分：灰分的测定： 一第7部分：淀粉的测定； 第8部分：蛋白质的测定； 第9部分：脂类的测定.
本文件由能源行业非粮生物质原料标准化技术委员会（NEA/TC24）归口. 本文件起草单位：中国农业大学.
本文件主要起草人：李蒙、张佳佳、谢光辉.
NB/T34057.7-2020 木质纤维素类生物质原料化学成分的测定 第7部分：淀粉的测定 1范围 本文件规定了木质纤维索类生物质原料淀粉测定的术语和定义、原理、仪器设备、试剂、试验步骤、试 验数据处理以及精密度.
本文件适用于农林废弃物、能源植物等各类草本或木本木质纤维素类生物质原料标准样品（包括衍生 材料）.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.
其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 NB/T34029非粮生物质原料名词术语 NB/T34057.1木质纤维索类生物质原料化学成分的测定第1部分：标准样品的制备 NB/T34057.2木质纤维素类生物质原料化学成分的测定第2部分：标准样品的纯化 NB/T34057.6木质纤维素类生物质原料化学成分的测定第6部分：灰分的测定 3术语和定义 NB/T34029界定的下列术语和定义适用于本文件，为了便于使用，以下重复列出了NB/T34029中 的某些术语和定义.
3.1 木质纤维素lignocellulosc 混有木质索、纤维素和半纤维象的天然植物纤维.
[来源：NB/T34029-2015，4.11] 3.2 淀粉starch 由葡萄糖的高聚体形成的碳水化合物，分为直链淀粉和支链淀粉两类.
[来源，NB/T34029-2015 4.12] 4原理 淀粉是由葡萄糖残基组成的直链或支链多糖，在α淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶处理后水解为葡萄糖的 形式，在规定的条件下定量测定.
5仪器设备 5.1恒温振荡水浴锅：可维持（100土3）C的条件.
5.21mL移液器.
5.315mL离心管.
5.4低速离心机，可维持3000r/min的条件.
NB/T34057.7-2020 5.5高效液相色谱仪：配有示差折光检测器.
5.6色谱柱及保护柱.
5.7色谱瓶.
5.80.22μm微孔滤膜.
5.95mL一次性注射器.
5.10广泛pH试纸：范围4~9.
5.11分析天平：精密度达0.0001g.
6试剂 所用试剂除注明外均为分析纯，所用水应符合GB/T6682中一级水的规定.
6.1α淀粉酶，1000U/mg.
6.2淀粉葡萄糖苷酶，70U/mg.
6.3磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液，0.1mol/L，pH-6.0.
6.4乙酸-乙酸钠缓冲液，0.1mol/L pH=4.6.
6.5二甲基亚矾.
6.695%乙醇.
6.7a淀粉酶溶液，388U/mL，在100mL磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液中加人38.8mg的a淀粉酶 进行配制.
6.8淀粉葡萄糖苷酶溶液，1000U/mL，在10mL乙酸-乙酸钠级冲液中加人138mg的淀粉葡萄糖苷酶 进行配制.
6.9淀粉标准品.
6.10色谱级D（）-葡萄糖.
6.11色谱级流动相.
7试验步骤 7.1标准样品的制备和纯化 7.1.1标准样品的制备方法按照NB/T34057.1的规定执行.
7.1.2所采用水分除注明外均为相对含水量，水分的测定方法按照NB/T34057.3的规定执行.
7.1.3标准样品的纯化方法按照NB/T34057.2的规定行.
7.1.4标准样品和校正样品灰分的测定方法按照NB/T34057.6的规定执行.
7.2标准样品的酶解 称取100mg纯化后的标准样品，精确至1mg，记录为W，将称量后的标准样品移人15mL离心管 中，加人95%乙醇0.2mL，加盖密封后振荡混匀.
打开盖子，立即加人2mL二甲基亚矾溶液，振荡混匀 后加盖密封，在100C的条件下水溶振荡提取5min.
打开盖子，加人a-淀粉酶溶液3mL，根据待测样品 淀粉含量水平，在100C的条件下水浴振荡提取6min～16min.
打开盖子，在水浴后的15mL离心管中加人4mL乙酸-乙酸钠缓冲液，加盖密封后振荡混匀.
打开 盖子，立即加人淀粉葡萄糖苷酶溶液0.4mL，加盖密封后振荡混匀，在50℃的条件下水浴振荡提取30 min，将盛有样品的15mL离心管冷却至室温，置于离心机中，在3000r/min的条件下离心10min，此时 淀粉酶解液的体积（V）为9.6mL，使用5mL一次性注射器和0.22μm微孔滤膜过滤，待测.
采用同样方法处理淀粉标准品，用于测试淀粉色谱校正标样回收率R.
7.3淀粉的测定 7.3.1高效液相色谱标准曲线的绘制 2
