HJ 国家环境保护总局标准 HJ/T40-1999 固定污染源排气中苯并（a）的测定 高效液相色谱法 Stationary source emission-Determination of benzo(a）pyrene- High performanceliquid chromatography 1999-08-18发布 2000-01-01实施 国家环境保护总局发布
目录 1适用范围 11 (1) 2方法原理 (1) 3引用标准 (1) 4试剂和材料 (1) 5仅器和设备 6样品的采集和保存 (2) 7样品的前处理 (2) 8色谱分析操作步骤 (3) 9结果的表示 (5) 10精密度和准确度. (5) 11说明. (5)
国家环境保护总局标准 固定污染源排气中苯并（a）花的测定 高效液相色谱法 HJ/T 40-1999 High performance liquid chromatography 1适用范围 1.1本标准适用于固定污染源有组织排放的苯并（a）芘测定.
1.2当采气体积为1.0m²，样品定容1.0ml，色谱进样量为10ul时，苯并（a）芘的检出限为2ng/m²，定量 测定的浓度范围为7.6ng/m²~4.0μg/m².
2方法原理 用无胶玻璃纤维滤筒或玻璃纤维滤膜采集样品，用环已烷提取苯并（a)芘，提取液通过费罗里硅土层 析柱，然后用二氯甲烷和丙酮的混合溶剂洗脱吸附在柱上的苯并（a）芘，经浓缩后在配有荧光检测器的高 效液相色谱仪上测定.
3引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用面构成为本标准的条文.
GB16157-1996固定污染源排气中颗粒物测定和气态污染物采样方法 4试剂和材料 除非另有说明，分析中均使用符合国家标准的分析纯试剂和按4.1制备的纯水.
4.1纯水 用去离子水（或蒸馏水）加高锰酸钾，在碱性条件下用全玻璃蒸馏器重蒸馏，在蒸馏全过程中应始终保 持紫红色，否则应补加高锰酸钾，所得纯水经本法的空白检验，应无显著干扰峰.
4.2甲醇 用全玻璃蒸馏器加碱重蒸，收集馏分，经0.45μm微孔滤膜过滤后使用，经本法空白检验，应无显著干 抗峰.
4.3二氯甲烷 服务平 用全玻璃蒸馏器加碱重蒸馏，经本法空白检验无干扰峰.
4.4丙酮 经与4.3相同的步骤处理.
4.5环已烷 经与4.3相同的步骤处理.
4.6费罗里硅土（Florisil）：60～100目，色层分析用.
在400℃加热2h，冷却后用水（4.1）调匀至含水量11%，密封保存于磨口试剂瓶中.
4.7苯并（a）花标准储备液 国家环境保护总局1999-08-18批准 2000-01-01实施 1
HJ/T 401999 准确称取固体苯并（a）芘标准物质20.0mg，溶于60ml环已烷（4.5）中，转移至100ml容量瓶中，用环 已烷（4.5）稀至标线.
或用苯并（a）芘标准溶液，用环已烷（4.5）或二氯甲烷（4.3）稀释成浓度为200μg/ml 的溶液.
上述储备液应保存在3～5℃冰箱中.
4.8苯并（a）芘标准使用液 吸取标准储备液（4.7）1.00ml于100ml容量瓶中，用环已烷（4.5）或二氯甲烷（4.3）稀释至标线.
由于 使用的仪器灵敏度或分析样品浓度不同，此标准使用液浓度应按需要改变.
5仪器和设备 5.1高效液相色谱仪：配备有荧光检测器.
5.2反相色谱柱 5.2.1柱材质：不锈钢柱.
5-2.2柱特性：柱长15~25cm，柱内径4.6mm.
5.2.3柱填料：5 μm Lichrosorb RP-18(即 ODS）或 5μm Hypersil ODS.
5.3索氏提取器（脂肪抽提器）：烧瓶容量50ml.
5.4层析柱：长150mm、内径10mm的圆柱形玻璃柱，下部玻璃活塞不涂润滑油.
5.5K-D浓缩器：附25mlK-D浓缩瓶（带刻度）.
5.6微量注射器：1.0pl，5.0pl 10.0pl，50.0pl.
5.7小玻璃珠或沸石、玻璃棉、玻璃纤维滤纸：400°C加热1h后存放于具磨口玻璃瓶中.
5.8其他常用玻璃器Ⅲ.
5.9恒温水浴锅：温控可调节.
5.10烟气采样仪 按GB16157-1996中8.3.3（对应普通采样管法采样）、8.4.2（对应皮托管平行测速采样法）、8.5.2 （对应动压平衡型等速采样管法）、8.6.2（对应静压平衡型等速采样管法）配置采样仪器.
选用与采样仪器 相匹配的无胶玻璃纤维滤筒或超细玻璃纤维滤膜取样.
6样品的采集和保存 6.1采样位置和采样点 按GB16157-1996中8.1确定采样位置和采样点.
6-2样品来集 滤简或滤膜装入采样仪上，然后按8.3～8.6中的某项（视采样方法而定）进行采样，采气体积约为1.0m”.
6.3样品的保存 采集好的样品须避光保存，或可用黑纸包好放入3~5°C冷藏箱申保存，采样后应尽快在24h内进行 前处理，处理好的样品在1个月内分析完毕.
7样品的前处理 7.1样品中苯并（a）芘的提取：将已采样品的无胶滤简或超细玻璃纤维滤膜（尘面朝里折叠后）小心放进 索氏提取器（5.3）的抽提简中（注意不要堵塞虹吸回流管）.加入80ml环已烷（4.5），置于温度为95℃以上 的水浴锅（5.9）中，连续回流提取6h，冷却备用.
7.2提取液的净化：所得的提取液（7.1）用费罗里硅土层析柱进行净化（和富集）.
7.2.1层析柱的装填：先将少量玻璃棉（5.7）填入玻璃层析柱（5.4）的下端用以承托填料.
加入2~3ml环 已烷（4.5）润湿柱子.
称约5g费罗里硅土（4.6）于小烧杯中，用环已烷（4.5）制成匀浆，以湿式装柱法装填 2
66601/ 入上述柱中，并放出柱中过量的环已烷至填料的界面以上.
7.2.2提取液的净化：从层析柱（7.2.1）的上端加入样品提取液（7.1），另用20~40ml环已烷（4.5）分三 次清洗（7.1）节中所用的索氏提取器，一并加入此层析柱的上端，全部溶液以<4ml/min的流速通过层析 柱，回收通过柱子的环已烷. 然后用二氯甲烷（4.3）和丙酮（4.4）的混合溶液（CHCl：CHCOCH=4：1） (a）芘的含量较高，则不需浓缩，定容后即可用液相色谱仪进行分析. ） 7.3试样的浓缩：将盛有洗脱液的K-D浓缩瓶接入K-D浓缩器（5.5）中，下部浸入通风橱中的水浴锅 （5.9）中，在60~70C的水温下减压浓缩至1ml左右，用少量丙酮（4.4）洗容器内壁，流入K-D浓缩瓶中， 再如上法浓缩至小于1ml，冷却，补加丙酮（4.4），定容1.0ml（有刻度），留待液相色谱分析（或将浓缩液转 移至液相色谱仪上自动进样器专用的进样小瓶中，封口后待进样. ） 8色谱分析操作步骤 8.1仪器调试：按装调试液相色谱仪，使之正常运行并能达到预期的分离效果，预热运行至获得稳定的基 线. 8.2色谱条件 8.2.1周定相 8.2.1.1反相色谱柱（5.2） 8.2.1.2柱箱温度：35℃ 8.2.2流动相 8.2.2.1流动相组成：Vm（D）V（*（1）=90：10 8.2.2.2流动相流速：0.6ml/min，亦可按柱的性能进行适当调整. 8.2.3一般采用等度洗脱，即恒溶剂组成恒流洗脱. 在做实际样品时，为了加快后面杂质峰的流出，可在 苯并（a）芪峰流出后适当改变溶剂组成或改变流速进行梯度洗脱，以减少下一次进样的等待时间. 8.2.4检测器：使用荧光检测器，设定激发波长入=364nm，发射波长入=427nm. 8.2.5进样量：1~20ul，通常为10pl，自动或手动. 8.2.6记录仪或积分仪 8.2.6.1放大（或衰减）：依据样品中被测组份的含量进行适当调节，使所得谱图在记录纸的量程以内. 8.2.6.2纸速：0.3或0.5cin/min. 8.3校准 8.3.1采用外标法定量 8.3.2标准样品 8.3.2.1标准样品的制备，见4.8节. 8.3.2.2使用次数：使用标准样品（4.8）进行周期性的重复校准，视色谱仪的稳定性能状况，决定重复校 准周期的长短，一般每个工作日测定1或2次，或者在每测定5个荐品后校准一次. 8.3.2.3色谱分析时使用标准样品的条件 8.3.2.3.1标准样品和试样在进样体积上最好相同，响应值也应接近. 8.3.2.3.2调节仪器的重复性条件：在仪器运转正常的情况下，连续二次进标准样品10网，其响应值（峰 高或峰面积）的相对偏差不大于5%即可认为仪器处于稳定状态. 8.3.3校准数据的表示：以响应值对进样量作校准曲线，可得一条通过原点的直线. 响应值与进样量的比 值为一常数，可用平均比值或响应因子代替校准曲线来计算测定结果. 8.4测定 8.4.1进样 8.4.1.1进样方式：自动进样器进样，或用注射器进行手动六通阀进样.
