BJS 食品补充检验方法 BJS 202402 食品中别嘌醇、苯溴马隆、非布司他等 化合物的测定 2024-12-22发布 国家市场监督管理总局 发布
BJS 202402 食品中别嘌醇、苯溴马隆、非布司他等 化合物的测定 1范围 本方法规定了食品（含保健食品）中别嘌醇、奥昔嘌醇、非布司他、托匹司他、磺吡酮、雷西纳德、氯沙 坦、曲尼司特、苯澳马隆和阿卤芬酯的高效液相色谱-串联质谱测定方法.
本方法适用于压片糖果、饮料（含固体饮料）代用茶、代餐食品等食品（包括上述类似基质的片剂、 胶囊剂等形式的保健食品）中别嘌醇、奥昔嘌醇、非布司他、托匹司他、磺吡酮、雷西纳德、氯沙坦、曲尼司 特、苯溴马隆和阿卤芬酯的测定.
2原理 试样经水和乙晴（含0.1%乙酸）混合溶液超声提取，提取液经氨基固相萃取小柱净化后，高效液相 色谱-三重四级杆串联质谱仪测定，外标法定量.
3试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水.
3.1试剂 3.1.1甲醇（CHOH）：色谱纯.
3.1.2乙晴（CHCN）：色谱纯.
3.1.3乙酸（CHCOOH）：色谱纯.
3.1.4二甲亚矾（CHOS）：色谱纯.
3.1.5氨水（NHHO） 3.2试剂配制 3.2.10.1%乙酸水溶液：量取乙酸（3.1.3)1mL，用水稀释至1000mL，用滤膜（0.22μm，水系）过滤后 备用.
3.2.20.1%乙酸乙晴溶液：量取乙酸（3.1.3）1mL，用乙腾（3.1.2）稀释至1000mL. 3.2.30.1%氨水甲醇溶液：取氨水（3.1.5）1mL，用甲醇（3.1.1）稀释至1000mL.
3.3标准品 别嘌醇、奥昔嘌醇、非布司他、托匹司他、磺吡酮、雷西纳德、氯沙坦、曲尼司特、苯溴马隆和阿卤芬酯 标准品，纯度≥98%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质.
10种标准品的中文名称、英文名 称、CAS号、分子式、相对分子质量见附录A.
3.4标准溶液配制 3.4.1标准储备液（1.0mg/mL）：分别准确称取别原醇、奥昔嗪醇、托匹司他（3.3）0.01g（精确至0.0001g），
BJS 202402 加人少量二甲亚（3.1.4）溶解后，溶液分别转移至10mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀， -18C避光贮存，有效期6个月，分别准确称取非布司他、磺吡酮、雷西纳德、氯沙坦、曲尼司特、苯澳 马隆和阿卤芬酯标准品（3.3）0.01g（精确至0.0001g），加人少量甲醇（3.1.1）溶解后，溶液分别转移至 10mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，-18℃避光贮存，有效期6个月.
3.4.2混合标准中间溶液I：分别准确移取奥昔嗪醇标准储备液2.0mL、别嘌醇标准储备液1.0mL、 非布司他、托匹司他、磺毗酮、雷西纳德、氯沙坦、曲尼司特、苯溴马隆和阿卤芬酯标准储备液各0.1mL 于10mL容量瓶中，用甲醇（3.1.1稀释至刻度，配制成混合标准中间液，其中奥音醇质量浓度为 200pg/mL、别嘌醇质量浓度为100μg/mL，非布司他、托匹司他、磺毗酮、雷西纳德、氯沙坦、曲尼司特、 苯澳马隆和阿卤芬酯质量浓度均为10μg/mL.
-18C避光贮存，有效期3个月. 3.4.3混合标准中间溶液Ⅱl：准确移取混合标准中间溶液I（3.4.2）0.1mL于10mL容量瓶中，用甲醇 （3.1.1）稀释至刻度，配制成奥昔嘌醇质量浓度为2μg/mL，别嘌醇质量浓度为1μg/mL，非布司他、托 匹司他、磺毗酮、雷西纳德、氯沙坦、曲尼司特、苯溴马隆和阿卤芬酯质量浓度均为0.1ug/mL的混合标 准中间液，临用现配.
中间溶液Ⅱ（3.4.3）于10mL容量瓶中，用乙酸-乙晴水溶液（3.2.4）稀释成混合标准工作溶液，得到奥昔 嘌醇质量浓度为5.00ng/mL 10.0 ng/ml 20.0 ng/mL、50 0 ng/mL 100 ng/mL 200ng/mL 别嘌醇 质量浓度为 2.50 ng/mL、5.00 ng/mL、10.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50 0 ng/mL、100 ng/mL.
托匹司他、 氯沙坦、磺吡酮、雷西纳德、曲尼司特、阿卤芬酯、非布司他、苯溴马隆的质量浓度为0.250ng/mL、 0 500 ng/mL 1.00 ng/mL 2.50 ng/mL 5 00 ng/mL 10.0 ng/mL I临用现配 3.5材料 3.5.1聚四氟乙烯离心管：50mL. 3.5.2氨基固相萃取柱（500mg/6mL）或性能相当者.
3.5.3微孔滤膜；0.22pm，水系.
3.5.4微孔滤膜：0.22μm，有机系.
4仪器和设备 4.1高效液相色诺谱-三重四级杆串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）.
4.2天平：感量分别为0.001g和0.0001g.
4.3接碎机.
4.4涡旋混合器.
4.5高速离心机：最大转速≥8000r/min. 4.6氮气浓缩装置.
4.7超声波发生器.
4.8固相萃取装置.
5分析步骤 5.1试样制备与保存 5.1.1液体试样 样品直接混匀，分成2份，分别装人洁净容器内，密封作为试样，标明标记.
将试样置于4C保存.
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BJS 202402 5.1.2固体饮料、代用茶和代餐食品等试样 取适量代表性样品，用捣碎机捣碎均匀后，分成2份，分别装人洁净容器内，密封作为试样，标明标 记.
将试样置于室温下保存.
5.1.3压片糖果、片剂、胶囊剂等试样 取不少于20颗或全部试样（试样少于20题时），充分接碎或研磨混匀（硬胶囊连同胶囊壳一起热 碎，混合均匀），分成2份，分别装人洁净容器内，密封并标识作为试样，软胶囊需将内容物取出，胶囊壳 剪碎后与内容物一起混匀，密封并标识，将试样置于室温下保存.
5.2样品前处理 5.2.1提取 5.2.1.1液体试样 称取1.0g混合均匀的试样（精确至0.001g）置于50mL具盖离心管中，加人5.0mL水，加盖后涡 旋3min，加人15mL0.1%乙酸乙晴溶液（3.2.2），超声提取15min，放冷至室温后，样液转移至50mL 容量瓶中，用0.1%乙酸乙腾溶液（3.2.2）稀释定容至刻度，混匀后待净化.
5.2.1.2固体试样（固体饮料、压片糖果、代用茶、代餐食品等食品及类似基质的片剂、硬胶囊剂等保健 食品） 称取1.0g混合均匀的试样（精确至0.001g）于50mL具盖离心管中，加人5.0mL水，加盖后涡旋 3min，加人15mL0.1%乙酸乙晴溶液（3.2.2），超声提取15min，放冷至室温，6000r/min离心5min， 取上层清液转移至50mL容量瓶中.
在残渣中再加人15mL0.1%乙酸乙晴溶液（3.2.2），涡旋混匀 5min，6000r/min离心5min，合并上清液于容量瓶中，并用0.1%乙酸乙晴溶液（3.2.2）定容至刻度， 混匀后待净化.
5.2.1.3软胶囊 称取1.0g混合均匀的试样（精确至0.001g）于50mL具盖离心管中，加入15mL0.1%乙酸乙晴溶液 （3.2.2），加盖后涡旋3min使试样充分溶解，加人5.0mL水，超声提取15min，放冷至室温，6000r/min离 心5min，取上层清液转移至50mL容量瓶中.
在残渣中再加入15mL0.1%乙酸乙溶液（3.2.2），涡 旋混匀5min，6000r/min离心5min，合并上清液于容量瓶中，并用0.1%乙酸乙溶液（3.2.2）定容至 刻度，混匀后待净化.
5.2.2净化 先用6mL甲醇（3.1.1）预淋洗氨基固相萃取小柱，弃去淋洗液.
然后取1.0mL上述提取液（5.2.1） 过柱，并用10mL0.1%氨水甲醇溶液（3.2.3）洗脱，保持流速为0.5mL/min，上样时开始收集全部流出 液于尖底刻度离心管中，于40℃氮气吹至近干（避免吹干），用乙酸-乙晴水溶液（3.2.4）定容至1.0mL， 涡旋混匀后，过0.22μm滤膜，供测定.
5.3仪器参考条件 5.3.1液相色谱参考条件 液相色谐参考条件如下：
BJS 202402 a）色谱柱：C柱，150mmX4.6mm（内径），粒径5μm，或性能相当者； b）流动相：A为0.1%乙酸水溶液（3.2.1)，B为乙晴（3.1.2)，梯度洗脱程序见表1. c）流速：0.4mL/min; s（P e）进样量：10pL.
表1梯度洗脱程序 时间/min 流动相A/% 流动相 B/% 0 90 10 6 90 10 10 50 50 13 25 75 18 2 98 21 2 98 21.1 90 10 25 90 10 5.3.2质谱参考条件 质谱参考条件如下： a）离子源：电喷雾离子源（ESI）； b）扫描方式：负离子扫描； c）检测方式：多反应监测（MRM） d）其他质谱参考条件见附录B.
5.4定性测定 按照上述条件测定混合标准工作液和试样溶液，记录混合标准工作溶液和试样溶液中各化合物的 保留时间，在相同条件下，试样溶液与标准溶液中待测组分的色谱峰相对保留时间偏差在土2.5%以内， 并且试样色谱图中所选择的监测离子对的相对丰度比与浓度相当的标准溶液的离子相对丰度比（k）的 偏差不超过表2规定的范围，则可判定试样中检出对应的被测化合物.
标准溶液的多反应监测（MRM） 离子色谱图参见附录C.
表2定性时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% k>50 20<k≤50 10<<2 k≤10 允许相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 5.5定量测定 5.5.1标准曲线的制作 将混合标准系列工作液（3.4.4）按仪器参考条件（5.3）进行测定，以被测组分浓度为横坐标，以被测 组分色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得到线性回归方程.
