ICS67.180.10 CCS X31 GH 中华人民共和国供销合作行业标准 GH/T 1313-2020 蜂蜜中甘油含量的测定 高效液相色谱法 Determination of glycerol in Honey- High performance liquid chromatography method 2020-12-07发布 2021-03-01实施 中华全国供销合作总社 发布
GH/T1313-2020 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
本文件由中华全国供销合作总社提出.
本文件由全国蜂产品标准化工作组（SAC/SWG2）归口.
本文件起草单位：杭州碧于天保健品有限公司、秦皇岛海关、安徽蜜之源食品集团有限公司、北京 百花蜂业科技发展股份公司、浙江省食品药品检验研究院、中国蜂产品协会蜂蜜专业委员会.
本文件主要起草人：周萍、尹志红、李学民、李加芬、叶发金、股客卿、郭利军、李樱红、谭丽蕊.
GH/T 1313-2020 引言 本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，涉及到本文件给出的测定方法的申请专利 （CN201910237161.5）的使用.
本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场.
该专利持有人已向本文件的发布机构保证，他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下， 就专利授权许可进行谈判.
该专利持有人的声明已在本文的发布机构备案.
相关信息可以通过以下联系 方式获得： 专利持有人：杭州碧于天保健品有限公司.
地址：浙江省杭州市桐庐县桑园路18号.
请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利.
本文件的发布机构不承担识别这些专利 的责任.
GH/T 1313-2020 蜂蜜中甘油含量的测定 高效液相色谱法 1范围 本文件规定了蜂蜜中甘油含量的高效液相色谱测定方法.
本文件适用于蜂蜜中甘油含量的测定.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.
其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义.
4原理 试样溶解后经吸附分散，提取，蒸干，复溶，液相色谱分离，示差检测器检测，内标法定量.
5试剂与材料 除非另有规定，试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682中一级水的规定要求.
5.1乙醇（CHCH0H，95%）.
5.2微粉硅胶（Si0，≥99%）：医药级，粒径≤45μm.
5.3赤藓糖醇（CH0HCHOHCHOHCHOH，CAS号：149-32-6，≥99%）.
5.4乙睛（CHCN）：色谱纯.
5.5甘油（CH0HCHOHCHOH，CAS号：56-81-5，≥99%）：标准品.
5.6内标溶液（100mg/mL）：称取1g赤藓糖醇（5.3），精确到0.1mg，于10mL容量瓶中，用少量水 稀释、溶解，加1mL乙醇，摇匀，用水定容至刻度.
密封，0~8℃保存期6个月.
5.7甘油贮备液（200mg/ml）：称取2g甘油（5.5），精确到0.1mg，于10mL容量瓶中，用水定容至 刻度.
密封，0~8℃保存期12个月.
5.8甘油工作标准溶液I（20mg/mL）：取1mL甘油贮备标准溶液（5.7），用水定容至10mlL.
5.9甘油工作标准溶液Ⅱl（2mg/mL）：取1mL甘油工作标准溶液1（5.8），用水定容至10mL.
5.10乙晴水溶液（91）：量取90mL乙晴与10mL水混合均匀.
5.11空白样品：取空白样品、添加50mg/kg甘油的空白样品，按本文件规定的方法进行测定，添加
GH/T 1313-2020 50mg/kg甘油的空白样品的甘油峰面积（S）与空白样品甘油保留时间处的峰面积（N）的比值（S/N） 应大于10.
密封，0~8℃保存期6个月，-18℃以下保存期24个月.
6仪器和设备 6.1高效液相色谱仪：配有示差折光检测器.
6.2分析天平：感量为0.1mg和0.01g.
6.3电热板.
6.4超声波清洗器.
6.5离心机：转速≥4000rpm.
6.6滤膜：0.22μm，有机相型.
6.7蒸发Ⅲ：90mm.
6.8茄形瓶：50mL.
6.9单通道可调移液器：量程为1mL，5mL.
6.10玻璃离心瓶：50mL.
6.11容量瓶：10mL.
6.12量筒：200mL，1000mL.
7试样制备与保存 7.1试样的制备 对于无结晶试样，搅拌均匀.
对于结晶的样品，在密闭的情况下，放置于不超过60℃的水浴中直 至全部融化，冷却至室温，授拌均匀.
7.2试样保存 8测定步骤 8.1试样溶液的制备 称取蜂蜜样品5.0g，精确至0.05g，于90mm蒸发Ⅲ中，分别加入内标溶液（5.6）200uL，水1 mL，乙醇（5.1）5mL，搅拌均匀至完全溶解，加入2.5g微粉硅胶（5.2），搅拌充分分散，150C电热 板上缓缓边搅排边蒸干，转入50mL玻璃离心瓶中，加入20mL乙睛（5.4），混匀，超声20min，每 隔5min取出摇匀，4000rpm离心3min，吸取上清液于50mL茄形瓶中，残渣中再加入20mL乙晴重 复提取一次，合并上清液，70C下旋转蒸发至干，加1mL乙睛水溶液（91）（5.10），超声溶解残渣， 吸取溶解后的样液经0.22μm滤膜过滤，得试样溶液.
8.2空白基质标准曲线工作溶液的制备
