ICS67.220.20 CCS X 41 GH 中华人民共和国供销合作行业标准 GH/T 1330-2021 食品添加剂半乳甘露聚糖中半乳糖与甘露 糖的摩尔分数测定毛细管气相色谱法 Determination of themolefractionof galactose andmannose in galactomannan as foodadditiveCapillarygaschromatography 2021-03-11发布 2021-05-01实施 中华全国供销合作总社 发布
GH/T1330-2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
本文件由中华全国供销合作总社提出并归口.
本文件起草单位：中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究院、苏州佰思纬食品安全科技 有限公司、安徽万礼食品有限责任公司、江苏省理化测试中心、江苏佳信检测技术有限公司、华测检测 认证集团北京有限公司、广饶六合化工有限公司、中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所、盐城师范 学院、南京农业大学、江苏国测检测技术有限公司.
本文件主要起草人：徐慧、张焕仕、雷鹏、刘杰、朱昌玲、孙达锋、张锋伦、张卫明、单春生、崔 岩、张书玉、任树亮、傅雷、陈志勇、唐伯平、张代臻、汪正飞、陈芳芳、项厚生、王韦岗、安俊芳.
GH/T 1330-2021 食品添加剂半乳甘露聚糖中半乳糖与甘露糖的摩尔分数测定毛细 管气相色谱法 1范围 本文件规定了半乳甘露聚糖中半乳糖与甘露糖摩尔分数的测定方法.
本文件适用于半乳甘露聚糖胶产品.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.
其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件.
3. 1 半乳甘露聚糖galactomannan 由半乳糖和甘露糖构成的杂聚糖，其基本结构是由B-（1-4)-D-甘露糖构成主链，在主链上通过a -（1-6）糖苷键连接有单个D-半乳糖形成的支链.
3. 2 半乳糖galactose 又名D-（）-半乳糖、D-吡喃半乳糖，分子式为CHsO，相对分子质量为180.16，其结构式如下： CHOH OH OH OH OH 3. 3 甘露糖mannose 又名D-（）-甘露糖、D（）甘露糖，是半乳糖的同分异构体，分子式为CHO，相对分子质量为 180.16，其结构式如下：
GH/T 1330-2021 CHOH H H 4原理 半乳甘露聚糖在高温条件下，通过酸解作用可被水解为半乳糖和甘露糖，半乳糖和甘露糖经过糖睛 乙酸酯衍生化后形成的半乳糖衍生物和甘露糖衍生物可通过气相色谱进行分析，内标法定量（内标物采 用肌醇）.
5试剂和仪器 本文件所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水.
5.1试剂 5.1.1无水乙醇（CHOH）.
5.1.2浓硫酸（HS0，98%）.
5.1.3碳酸钡（BaCO）.
5.1.4D-甘露糖标准品（CH：0），纯度≥98.0%.
5.1.5D-半乳糖标准品（CH0），纯度≥98.0%.
5.1.6盐酸羟胺（HO-NHHC1） 5.1.7肌醇（CH（OH）.
）.
5.1.8吡啶（CHN）.
5.1.9醋酸酐（CHO）.
5.1.10氢（H），纯度99.999%.
5.2仪器 5.2.1气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器.
5.2.2分析天平：感量0.1mg和0.01g.
5.2.3冷冻干燥机：非接触式.
5.2.4离心机：转速不低于8000r/min.
5.2.5微量注射器：1μ、5.
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GH/T 1330-2021 6分析步骤 6.1半乳甘露聚糖的纯化 称取0.5g试样，溶于水中并定容至50ml，室温下搅拌溶解，然后将试样溶液在8000rpm下离心10 min，弃去沉淀，保留上清液.
向上述离心上清液中加入150mL无水乙醇，并充分混匀.
将混合溶液在8000rpm下离心10min，弃 去上清液，将沉淀置于冷冻干燥机中冻干，即得到纯化的半乳甘露聚糖.
6.2半乳甘露聚糖的水解 称取20mg6.1中纯化的半乳甘露聚糖样品于安瓶中，加入1mol/L的硫酸2mL，封管后105C水 解8h，冷却至室温，加入过量BaC0.中和至样品溶液中无气泡产生，8000rpn离心10min除去沉淀， 上清液置于冷冻干燥机中冻干.
6.3标准单糖的衍生化方法 分别称取D-甘露糖和D-半乳糖标准品2mg混合，加入10mg盐酸羟胺，2mg肌醇，1mL吡啶， 90C水浴震荡30min.
冷却至室温后加入1mL醋酸酐，90C水浴加热30min，冷却至室温.
6.4水解单糖的衍生化方法 称取4.0mg6.2中制备的水解单糖样品，按照6.3所述衍生化方法进行处理.
6.5色谱条件 色谱柱：14%氰丙基聚苯基硅氧烷石英毛细管柱，30m×0.32mm（id）×0.25μ：或等效柱； 检测器：氢火焰离子检测器： 气化室温度：260C： 检测器温度：250C： 进样量：0.2 柱温采取程序升温：起始温度165C保持3min，每分钟升5C，升温至240C保持20min； 分流比：30：1.
6.6色谱分析 按6.5规定的色谱条件将6.3、6.4中制各的待测液依次注入气相色谱仪进行分析，记录色谱图.
标 准单糖和半乳甘露聚糖（以胡芦巴胶为例）的典型色谱图参见附录A.
7结果计算 服多 7.1校正因子计算 半乳糖和甘露糖的校正因子分别以f和f表示，并按式（1）和（2）计算.
fG=AsWsc AscWs1 (1) M=AW AsMWs1 (2) 式中：
