ICS 67 050 CCS C 53 团 体 标 准 T/CAQ1385-2024 棉花品种溯源SSR分子标记法 Cotton variety traceability-SSR based method 2024-04-29发布 2024-05-28实施 中国质量检验协会 发布
T/CAQ1 目次 前言 II 1范围 2规范性引用文件 3术语和定义 4缩略语 1 5原理 6试剂与溶液. 7仪器设备 8品种溯源检测程序 9数据分析. 10结果报告
T/CAQ13852024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规 则》的规定起草.
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本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由阿拉尔市南博农业科技服务有限责任公司提出.
本文件由中国质量检验协会归口.
本文件主要起草单位：浙江工业职业技术学院、北京服装学院、绍兴市工业设计协会、 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、新疆棉城种业有限公司、洁丽雅家居股份 有限公司、阿克苏苏纺织有限公司、新疆忠富纺织科技有限公司.
本文件主要起草人：汪芳、龚美、陈爱亮、潘春平、张娟、郭晟材、高荧羲、刘清明、 王利胜、姚知含、张峰、张明武.
本文件为首次发布.
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T/CAQ1 棉花品种溯源SSR分子标记法 1范围 本文件规定了品种溯源的概念、棉花品种溯源的原理及利用简单重复序列（simple scequencerepcat，SSR）标记进行棉花品种溯源检测的操作、数据分析、结果判定.
本文件适用于棉花品种溯源.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.
其中，注日期 的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括 的修改单）适用于本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 NY/T2634-2022棉花品种真实性鉴定SSR分子标记法 3术语和定义 NY/T2634-2022界定的以及下列术语和定义适用于本文件.
3.1 品种湖源variety traceability 供检品种与文件记录（如标签等）是否相符以及品种间在DNA分子标记带型上的一致 性：指通过比对检测样品或产品附带的文件记录（如标签、清单等），并进行DNA分析， 判断其品种是否与文件记录一致，并评估不同品种之间在DNA分子标记带型上的相似性水 平.
下列缩略语适用于本文件.
SSR：简单重复序列(Simple Sequence Repeat) DNA：脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid) PCR：聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction） CTAB：十六烷基三甲基澳化铵（Cetyltrimethylammonium Bromide) SDS：十二烷基硫酸钠(Sodium DodecylSulfate) PVP 40，PVP 30：聚乙烯聚吡略烷酮（Polyvinyl Pyrrolidone）
T/CAQ13852024 吐温-20：聚山梨醇酯-20（Tween-20） 5原理 棉花的不同品种含有各自特征性的DNA序列信息，根据SSR序列两端保守的单拷贝序 列设计特异引物，利用PCR技术扩增和电泳分析，获得单一品种棉纤维的SSR电泳带型.
将受检样品与标准样品的带型逐一进行差异比较和判读并分析，进行棉花品种的溯源.
6试剂与溶液 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级水.
6.1无水乙醇（CHOH）.
6.2氯仿（CHC1）.
6.3异戊醇（CH0）.
6.4异丙醇（CH0）.
6.5乙酸钾（CH COOK）.
6.6乙酸钠（CH COONa）.
6.7氯化钠（NaC1）.
6.8β-蔬基乙醇（CHOS）.
6.9聚乙烯聚吡略烷酮（（CHNO），（CHNO））.
6.10乙二胺四乙酸二钠二水合物（CHN0 Na2H0）.
6.11三（羟甲基）氨基甲烷（CHNO）.
6.12十六烷基三甲基溴化铵（C HBrN）.
6.13十二烷基硫酸钠（C_H_SONa）.
6. 14Tween20 吐温20 （CH0).
6.15CTAB裂解液：分别称取三（羟甲基）氨基甲烷（CH NO ）12.11mg、乙二胺四乙酸 二钠二水合物（CuHN0Na-2H0）3.72mg、十六烷基三甲基澳化铵（CHgBrN）20g、PVP 30[（C H NO)] 20 g、吐温20（CHO）20 g、氯化钠（NaC1）58.44 g、β硫基乙醇（C H0S) 2ml，定容至1000ml，调整pH至8.0，4C保存备用.
6.16SDS裂解液：分别称取乙酸钠（CH C00Na）8.20 g、乙二胺四乙酸二钠二水合物 （CH N 0 Na -2H 0）18.61 mg、氯化钠（NaC1）29.22 g、十二烷基硫酸钠（C H_S0 Na）20 g、PVP 40[(C H NO)]1g 和β-基乙醇（C H 0S）2mL，溶解于 800mL水中，定容至1000 ml，4C保存备用.
6.17乙酸钾溶液：称取490.70g乙酸钾（CHC00K），溶解于800mL水中，定容至1000 mL，终浓度为5mol/L，4C保存备用.
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