ICS13. 020. 01 CCS D00/09 T/GRM 中关村绿色矿山产业联盟团体标准 T/GRM097-2024 耐盐深色有隔内生真菌筛选与鉴定技术体 系 Screening and Identification of Salt Tolerant Dark Septate Endophytic Fungi (DSE) 2024-12-23发布 2024-12-24实施 中关村绿色矿山产业联盟 发布
T/GRM 097-2024 目次 前言 III 1范围 2规范性引用文件 3术语和定义 3.1 耐盐深色有隔内生真菌（Salt tolerant Dark Septate Endophytes， STDSE) 3.2耐盐性（Salt Tolerance） 3.3筛选（Screening） 3.4分离（Isolation） 3.5形态学鉴定（MorphologicalIdentification）： 3.6 分子学鉴定（MolecularIdentification）： 3.7 菌落直径（Colony Diameter） 3.8梯度盐胁迫固体培养基（Salt Stress Medium） 3.9菌丝生长速率（Mycelial Growth Rate） 3.10菌落抑制率（ColonyInhibition Rate） 2 4操作规程. 4.1耐盐深色有隔内生真菌的分离纯化与保藏参照附录A执行.
4.2耐盐深色有隔内生真菌的鉴定参照附录B执行.
4.3耐盐深色有隔内生真菌的耐盐性参照附录C执行.
5耐盐性评价.
5.1形态学特性 5.2分子鉴定 5.3耐盐性 6包装、运输和贮存 6.1包装， 2 6.2运输 6.3贮存.
附录A（规范性） 耐盐深色有隔内生真菌的分离纯化与保藏 A.1供试材料 A.2仪器设备 A.3筛选步骤 附录B（规范性） 耐盐深色有隔内生真菌的鉴定.
B.1 供试材料， B.2仪器设备 B.3深色有隔内生真菌的形态学鉴定 B.4深色有隔内生真菌的分子生物学鉴定 附录C（规范性） 耐盐深色有隔内生真菌的耐盐性 C.1供试材料
T/GRM 097-2024 C.2仪器设备 C.3操作步骤 C.4结果计算，
T/GRM 097-2024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
耐盐深色有隔内生真菌（Salt tolerant Dark Septate Endophytes，STDSE）是一类存在于植物 体内、具有特殊生态适应性的重要微生物资源，广泛分布于盐碱地及其他逆境环境中.
该类真菌在提高 宿主植物耐盐性、促进植物生长、改善盐碱地土壤生态功能方面具有重要潜力.
耐盐深色有隔内生真菌 的筛选与鉴定流程团体标准的制定，包括样品采集、真菌分离培养、耐盐性评价及真菌鉴定等关键步骤， 建立科学、易操作的筛选和鉴定技术体系，为耐盐真菌资源的开发与利用提供科学依据与技术指导.
这 不仅有助于提高耐盐深色有隔内生真菌的筛选效率和鉴定准确性，也为盐碱地生态环境的恢复与可持续 发展提供了可行的技术支持.
本文件由中关村绿色矿山产业联盟提出并归口.
本文件起草单位：西安科技大学西部矿山生态环境修复研究院、中国矿业大学（北京）矿山生态修 复研究院、天山实验室、北京合生元生态环境工程技术有限公司.
本文件主要起草人：毕银丽、彭苏萍、张士双、谭海、全文智、武超、解琳琳、肖礼、王坤、柯增 鸣、白雪蕊、张延旭 II1
T/GRM 097-2024 耐盐深色有隔内生真菌筛选与鉴定技术体系 1范围 本文件规定了耐盐深色有隔内生菌分离筛选样品的采集、分离、培养、耐盐性评价及鉴定贮存等要 求.
本文件适用于从盐碱地区植物内生组织中分离筛选耐盐深色有隔内生真菌.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用面构成本文件必不可少的条款.
其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于本 文件.
GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB19489-2008实验室生物安全通用要求 GB/T5009.5-2016食品中还原糖的测定 《微生物分类鉴定手册》 NY/T3833-2021微生物肥料菌种保藏技术规范 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件.
3.1耐盐深色有隔内生真菌（Salt tolerant Dark Septate Endophytes，STDSE） 耐盐深色有隔内生真菌是指一类能够在高盐环境中生存、与植物共生而不引起病害的真菌，其菌丝 体呈现深色且具有明显的横隔结构.
3.2耐盐性（Salt Tolerance） 微生物或植物在一定浓度盐分（如NaC1）存在下维持正常生长和代谢活动的能力.
3.3筛选（Screening） 通过设定不同盐浓度梯度，比较菌株的生长特性，从中筛选出耐盐性强的目标真菌.
3.4分离（lsolation） 从植物样本中获取单一菌种的过程，包括样本处理、消毒、培养及分离纯化步骤，最终得到内生真 菌的纯培养物.
3.5形态学鉴定（Morphologicalldentification）： 通过观察微生物的物理特征（如形状、大小、颜色、菌丝和孢子结构）和生长特性识别和分类微生 物的方法.
3.6分子学鉴定（Molecularldentification）： 通过分析微生物的DNA或RNA序列来确定其种类和关系的方法.
3.7菌落直径（ColonyDiameter） 真菌在固体培养基上培养一定时间后，菌落的直径大小，通常作为表征菌体生长状况的重要指标之 3.8梯度盐胁迫固体培养基（SaltStressMedium）
