ICS 11.220 NS CCS B 41 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1087-2024 代替SN/T1087-2011 Q热检疫技术规范 QuarantineprotocolforQfever 2024-12-31发布 2025-07-01实施 中华人民共和国海关总器
SN/T 1087-2024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
辑性改动外,主要技术变化如下: 增加了聚合酶链式反应(PCR)(见第9章); 增加了实时荧光聚合酶链式反应(实时荧光PCR)(见第10章).
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.
本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口.
本文件起草单位:中华人民共和国石家庄海关、中华人民共和国广州海关、中华人民共和国温州 海关.
本文件主要起草人:王建昌、王素华、终铁铸、王金风、鱼海琼、郵志强、柯忠哲、马保华、刘立兵、 孙晓霞.
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: 2002年首次发布为SN/T1087-2002,2011年第一次修订; --本次为第二次修订.
SN/T 1087-2024 Q热检疫技术规范 1范围 本文件描述了Q热的病原分离鉴定、聚合酶链式反应、实时荧光聚合酶链式反应和血清学试验检 测方法,其中血清学试验包括间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验和补体结合试验.
本文件适用于进出境牛、羊等易感动物Q热的检疫和诊断,也适用于动物组织、血液、奶液、毛和皮 等动物产品和蜱中Q热病原的检测.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.
其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的引用文件,其最新版本(包括的修改单)适用于 本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB19489实验室生物安全通用要求 SN/T2123出人境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义.
4缩略语 下列缩略语适用于本文件: C.Burneti:贝氏柯克斯体(Coxiella burneti); CPE:致细胞病变效应(Cytopathic effect); DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid); ELISA:酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay); FAM:6-羧基荧光素(6-Carboxyfluorescein); FITC:异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate); HEL:人胚肺成纤维细胞(Human embryonic lung fibroblasts); IFA:间接免疫荧光试验(Indireet immunofluorescence assay); OD值:光密度值(Optimal density); PBS:磷酸盐缓冲液(Phosphate buffered solution); PCR:聚合酶链式反应(Polymerase chainreaction); Q Fever:Q 热(Query fever) ; VBD:巴比妥缓冲液(Barbiturate buffer).
SN/T 1087-2024 5试验操作生物安全要求 本文件所列各项试验操作应按照SN/T2984-2011中3.1的规定执行,具体防护措施及要求应按 照GB19489的规定执行.
6临床诊断 6.1疫病概述 Q热概述见附录A. 6.2临床症状 家畜患Q热的症状主要有怀孕后期的流产、早产、死产、弱仔、胎衣不下、子宫内膜炎和不育.
小反 当兽患Q热常伴发畜群突然流产,康复后感染可持续多年或终生.
6.3割检变化 流产胎儿的脾脏、肝脏、肾脏和生殖器官有大小不一的坏死灶和增生组织或肉芽肿.
6.4结果判定 易感动物出现上述临床症状和剖检变化,可初步判定为疑似Q热,确诊需要进行实验室诊断.
7样品采集、保存、运送与处理 7.1采样技术要求 样品采集、运输和保存应按照SN/T2123的规定执行.
7.2样品采集 7.2.1组织样品 采集出现流产、死胎或弱装、胎衣不下、子宫内膜炎的病畜胎盘子叶、肝、肺、流产胎儿皱胃内容物等 组织样品,用灭菌剪刀剪取所需器官的组织块,每个组织块应单独放在已消毒的容器内,每份质量为 10g~50g注明采样日期、组织和动物名称等.
7.2.2全血样品 用一次性含有非肝素(EDTA等)抗凝剂的真空采血管,由动物静脉无菌采血,充分混匀后静置.
7.2.3血清样品 用一次性真空血清采血管,由动物静脉无菌采血,连续摇匀,待血清凝集后,分离血清.
7.2.4分泌物和粪便拭子 用医用棉签在分娩或流产动物以及病死、发病动物的肛门或阴道内旋转数圈并取少量类便或分 泌物,将采集后的棉拭子立即放人盛有2mLPBS的采样管中. 2
SN/T 1087-2024 7.2.5生毛皮、毛、绒和蔡样品 从同批样品的不同部位共抽样5g~10g,装人无菌采样袋,密封.
7.2.6蜱样品 牛、羊等动物身下铺放白布,使用乙醚(或松节油、煤油、三氯甲烷)涂抹蜱头部,待蜱自行从动物身 体脱落,用镊子摘取脱落蜱,放置在1.5mL灭菌离心管中.
对于动物皮毛携带的蜱,可直接用镊子摘 取,放置在1.5mL灭菌离心管中. 7.2.7奶液样品 采集奶液于灭菌50mL离心管中,尽量于清晨采取,采前用温热毛巾将乳房擦拭干净,用2%碘伏 将乳头消毒,将头3把~4把乳汁弃去,采集后续奶液.
7.3样品保存及运送 采集的样品应在取样后4C冷藏24h内送至实验室,应附有标签或采样单,表明采样地点、动物来 源、采样数目、临床症状和采样时间、采样人等信息, 7.4样品处理 7.4.1组织样品 取适量组织样品,剪碎,按1:5的比例加人灭菌的含抗生素(链霉素100μg/mL~200μg/mL和 庆大霉素50μg/mL~100μg/mL)的0.1mol/LPBS(pH7.4),用组织研磨仪充分研磨5min~ 10min,制备成组织匀浆液;移入离心管,充分振荡,75C温浴0.5h~1h:15000g离心10min,弃上 清,加1mLPBS,振荡混匀,使沉淀充分悬浮,15000g离心10min,弃上清,收集沉淀物,置于一20℃ 贮存备用.
7.4.2全血样品 取1mL~2mL全血样品,编号,15000g离心10min,弃上清.
加等体积灭菌双蒸水充分振 荡,15000g离心10min,弃上清.
若红细胞裂解不完全,需采用灭菌双蒸水重复洗涤.
收集沉淀物,置 于一20C贮存备用.
7.4.3血清样品 无菌分离血清,装人2.0mL离心管中,编号,用于抗体检测.
7.4.4棉拭子样品 将采集的分泌物拭子和粪便拭子加人1mL灭菌的0.1mol/LPBS(pH7.4),于振荡器上充分振荡 混匀,将拭子中的液体充分挤压后弃去拭子,编号,置于一20℃贮存备用.
7.4.5生毛皮、毛、绒和样品 取1g样品放人灭菌三角瓶中,加人30mL4C预冷的0.5%TritonX-100PBS溶液,将瓶口塞 严,冰浴或置于4C冰箱内,间或摇动1h,将瓶中液体倒人50mL灭菌离心管中,盖住管口,3000g离 心10min去除样品中大的颗粒,取上层悬液15000g离心10min,弃上清,加1mLPBS充分振荡混 匀;将沉淀悬浮液移人1.5mL离心管,15000g离心10min,弃上清,收集沉淀物,置于一20C贮存