ICS 67.050 CCS C53 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T5594-2024 出口动物源食品中加米霉素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 Determination of gamithromycin residue in foodstuffs of animal origin for export LC-MS/MSmethod 2024-12-31发布 2025-07-01实施 中华人民共和国海关总署 发布
SN/T5594-2024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020（标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
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本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口.
本文件起草单位：中华人民共和国石家庄海关、中华人民共和国拱北海关.
本文件主要起草人：张海超、田浩、贾海涛、王敬、艾连峰、马育松、李玮.
SN/T 5594-2024 出口动物源食品中加米霉素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1范围 本文件描述了出口动物源食品中加米霉素残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法.
本文件适用于猪肉、猪脂肪、猪肝、猪肾、猪皮、牛肉、牛脂肪、牛肝、牛肾、牛奶、羊肉、羊脂肪、羊肝、 羊肾、鸡肉、鸡脂肪、鸡肝、鸡肾和鸡蛋等动物源食品中加米霉素残留量的测定.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 本文件.
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义.
4方法提要 试样中残留的加米霉素采用乙晴提取，混合型阳离子交换固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪 测定，内标法定量.
5试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水.
5.1甲醇：色谱级.
5.2乙晴：色谱级.
5.3甲酸：色谱级.
5.4氨水：色谱级，含量为25%~28% 5.5无水硫酸钠：650℃C烘烤4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密瓶中备用.
5.65%氨水甲醇溶液：量取5.0mL氨水（5.4）.用甲醇（5.1）定容至100mL，混匀.
5.70.1%甲酸水溶液：量取1.0mL甲酸（5.3），用水定容至1000mL.混匀.
混匀.
5.9加米霉素标准物质（CHNO，CAS号；145435-72-9）：纯度大于或等于99%.
5.10加米霉素-D标准物质（CHDNO）：纯度大于等于95% 5.11加米霉素标准储备液：准确称取加米霉素标准物质（5.9）10mg（精确至0.0001g），用甲醇（5.1） I
SN/T 5594-2024 溶解，配制成质量浓度为1.0mg/mL的标准储备液，一18C以下避光保存，有效期12个月.
5.12加米霉素-D 内标储备液：准确称取加米霉索-D.标准物质（5.10)10mg（精确至0.0001g），用甲 醇（5.1）溶解，配制成质量浓度为1.0mg/mL的标准储备液，-18℃以下避光保存，有效期12个月.
5.13加米霉素标准中间溶液：根据需要准确移取适量加米霉素标准储备液（5.11），用甲醇（5.1）稀释， 配制成质量浓度为1pg/mL的标准中间溶液，于0℃~4C冰箱内储存，有效期3个月.
5.14加米霉素-D.内标工作溶液：根据需要准确移取适量加米霉素-D 内标储备液（5.12），用甲醇 （5.1）稀释，配制成质量浓度为1pg/mL.的标准中间溶液，于0℃~4℃冰箱内储存，有效期3个月.
5.15标准工作溶液：根据需要，用初始流动相稀释标准中间溶液（5.13）成适合质量浓度的工作溶液， 并保证加米霉素-D 内标质量浓度为10ng/ml.
5.16固相萃取柱：MCX阳离子交换固相萃取柱，3mL（60mg）或性能相当者.
5.17微孔滤膜：0.22ym，通用型.
6仪器和设备 6.1液相色诺-质谱/质谐仪：配有电喷雾离子源（ESI） 6.2分析天平：感量为0.0001g和0.01g.
6.3组织揭碎机.
6.4均质器：转速不低于10000r/min.
6.5振荡器.
6.6涡旋混匀器.
6.7离心机：转速不低于10000r/min.
6.8氮气吹干仪.
6.9离心管：聚乙烯，具塞，50mL 7试样制备与保存 7.1通则 在样品制备和保存的操作过程中，应防止样品污染或发生待测物含量的变化.
7.2肌肉、内脏、脂肪、猪皮 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，切成小块，放人组织捣碎机均质制成肉糜状，充分混 匀，均分成2份，分别装入清洁容器内，并标明标记，将试样置于一18℃C冷冻保存.
7.3鸡蛋 从所取全部样品中取出有代表性样品，取可食部分约500g搅拌混匀，均分成2份分别装人清洁 容器内，并标明标记，将试样置于一18C冷冻保存.
7.4奶 从所取全部样品中取出代表性样品约500g，充分混匀，均分成2份，装人洁净容器作为试样，密封， 标明标记.
将试样置于4C冷藏保存.
SN/T 5594-2024 8测定步骤 8.1提取 8.1.1肌肉、内脏、脂肪、猪皮 准确称取2g试样（精确至0.01g）置于50mL离心管中，加人40μL加米霉素-D 内标工作溶液 上清液5mL，待净化.
8.1.2鸡蛋和牛奶 准确称取2g试样（精确至0.01g）置于50mL离心管中，加入40μL加米霉素-D 内标工作溶液 （5.14）.加人20mL乙晴和5g无水硫酸钠，用振荡器振摇提取20min后.10000r/min离心5min. 取上清液5ml，待净化 8.2净化 将MCX柱置于固相萃取架上，依次用3mL甲醇、3mL水活化，取上清液（8.1.1和8.1.2）过柱，控 制流速小于1mL/min，依次用3mL水、3mL甲醇淋洗，抽干；再用5%的氨水甲醇（5.6）4mL洗脱，于 40℃氮气吹干.
残余物用0.1%甲酸水-乙晴溶液（5.8）1mL.溶解，涡旋混匀，过0.22μm微孔滤膜后供 液相色谱-质谱/质谱仪测定.
8.3测定 8.3.1液相色谱条件 液相色谱条件参考如下.
a）色谱柱：C色谱柱，100mm×2.1mm（内径），1.7pm，或性能相当者.
b）柱温；30℃ c）流动相：A为0.1%甲酸水溶液；B为乙腊，梯度洗脱程序见表1.
d）流速；0.4mL/min.
e）进样量：5gl.
表1梯度洗脱条件 时间/min 流动相A/% 流动相 B/% 0 00 90 10 0 50 90 10 3 00 10 90 5 00 10 90 5.10 90 10 7 00 90 10 8.3.2质谱条件 质谱参考条件如下.
