ICS 67.050 CCS X 04 SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5595-2024 出口罐头食品商业无菌检测方法 顶空气相色谱质谱联用法 Determination of the mercial sterilization in export canned foods Headspace gas chromatography-mass spectrometry 2024-12-31发布 2025-07-01实施 中华人民共和国海关总署发布
SN/T5595-2024 前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草.
请注意本文件的某些内容可能涉及专利.
本文件的发布机构不承担识别专利的责任.
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口.
本文件起草单位：青岛海关技术中心、临沂大学.
本文件主要起草人：李正义、贾俊涛、王萍、张之旭、王帅、唐静、黄小华、姜英辉、刘云国、赵晗、段效辉、 殷培军、祝素珍、于娟娟、吕宁、张秋艳、吴丽娜、王伟、徐玮、马云.
SN/T 5595-2024 出口罐头食品商业无菌检测方法 顶空气相色谱质谱联用法 1范围 本文件规定了出口罐头食品商业无菌检测的基本要求、操作程序和结果判定.
本文件适用于微生物腐败产气导致变质的出口罐头食品的商业无菌检验，进口罐头食品的商业无 菌检验可以参考执行.
2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款，其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括的修改单）适用于 本文件.
GB4789.26-2013食品安全国家标准食品微生物学检验商业无菌检验 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件.
3. 1 平酸菌flat sour bacteria 在罐头工业上，引起罐头食品酸败变质面又不胖听（即产酸不产气）的微生物.
4方法提要 罐头中顶空气体的成分变化可检出由于细菌（平酸菌除外）腐败导致胀罐的样品.
使用气相色谱 质谱联用仪分析罐头食品的顶空气体，通过比较罐头食品保温前后的顶空气中二氧化碳的含量变化，对 罐头食品是否为商业无菌进行初步判断.
5试剂和材料 5.1应肉培养基：见GB4789.26-2013中附录B.
5.2溴甲酚紫葡萄糖肉汤：见GB4789.26-2013中附录B.
5.3酸性肉汤：见GB4789.26-2013中附录B 5.4麦芽浸膏汤：见GB4789.26-2013中附录B 5.5无菌生理盐水.
5.6结晶紫染色液.
5.7二甲苯.
SN/T 5595-2024 6仪器和设备 6.1气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击源（EI）.
6.2恒温培养箱：36℃士1C；55C士1℃. 6.3顶空自动进样器.
6.4冰箱：2℃C~5℃ 6.5电位pH计（精确度为0.05个pH单位）.
6.6显微镜：10倍~100倍.
6.7 顶空进样瓶：20mL 6.8微量移液器和灭菌吸头：10μL 20gL、200L、1000L.
6.9开罐器和罐头打孔器.
7检验程序 出口罐头食品商业无菌检验程序见图1.
样品 对然 检样 2C~5 冰箱保存 开启包装物 暂样，至少30mlL（）置 灭菌容器，2℃~5保存 保疆前后项空气体中CO含量测定 36℃±1℃.3d保 感官检查 p测定 除片染色镜检 符合商业无菌 不符合商业无菌 异营罐头的分析 报告 图1出口罐头食品商业无菌顶空气相色谱质谱联用法检验程序
SN/T 5595-2024 8操作步骤 8.1罐头食品准备 对同一生产批次的罐头，取1个样品置2℃～5℃冰箱中保存作为对照，取1个样品用于仅器分析 检测、感官检查、pH测定和涂片染色镜检.
8.2罐头食品的开启 8.2.1用温水擦净罐头外包装，放人无菌室，以紫外光杀菌灯照射30min.
8.2.2用75%酒精棉球擦拭罐头外包装（铁盒罐头擦拭后点燃灭菌），带汤汁的罐头开启前适当振摇 后，在超净工作台或百级洁净实验室中用灭菌开罐刀或罐头打孔器开启.
如样品为软包装，可以使用灭 菌剪刀开启，不应损坏接口处.
8.3罐头食品的留样 开启包装后，用灭菌吸管或其他适当工具以无菌操作取出内容物至少30mL（g）置灭菌容器内，保 存于2℃～5C冰箱中，在需要时可用于进一步试验，待该批样品得出检验结论后可弃去.
8.4感官检查 开启包装后，在超净工作台用灭菌吸管或其他适当工具以无菌操作取出内容物10mL（g）置灭菌顶 空进样瓶内，顶空瓶封口后36C士1C保温3d结束后，在光线充足、空气清洁无异味的检验室中，将样 品内容物倾人白色瓷盘内，对产品的组织、形态、色泽和气味等进行观察和噢闻，按压食品检查产品性 状，鉴别食品有无腐败变质的迹象，并记录.
8.5pH测定 冷藏保存对照样品相比，比较是否有显著差异.
pH相差0.5及以上判为显著差异.
8.6涂片染色镜检 8.6.1涂片 取顶空瓶保温后的样品内容物进行涂片.
带汤汁的样品可用接种环挑取汤汁涂于载玻片上，固态 食品可直接涂片或用少量灭菌生理盐水稀释后涂片，待干后用火焰固定，油脂性食品涂片自然干燥并 火焰固定后，用二甲苯流洗，自然干燥.
8.6.2染色镜检 对8.6.1中涂片用结晶紫染色液进行单染色，干燥后镜检，至少观察5个视野，记录菌体的形态特征 以及每个视野的菌数，与同批冷藏保存对照样品相比，判断是否有明显的微生物增殖现象.
菌数有百 倍或百倍以上的增长则判为明显增殖.
8.7罐头食品的顶空样品处理 开启包装后，在超净工作台用灭菌吸管或其他适当工具以无菌操作取出内容物10mL(g)置灭菌顶 空进样瓶内，顶空瓶封口后用顶空针抽取1mL上层气体进样，作为保温前GC-MS检测；同时用灭菌吸 管或其他适当工具以无菌操作取出内容物10mL（g）置灭菌顶空进样瓶内，顶空瓶封口后36C士1℃
